河北省2007-2011年猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学调查.pdf

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1、河北省2007—2011年猪繁殖单位代码：学号：与呼100862008456吸综合征病毒的分子流行病学调查InvestigationonMolecularEpidemiologyofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirusinHebeiin2007．．201学位申请人：王金凤指导教师：孙继国教授学科专业：预防兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一一年五月二十九日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或

2、撰写过的研究成果，也不包含为获得塑皇堡盔些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：铂职签字日期．Ⅵl『年参月砷学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑皇垦盔些盘鲎有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑兰堡盎些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：刁铆八导师签名：及{／调签字日期：p

3、

4、『年易月、／日签字日期：加17年易月y日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：摘要⋯irlrliiiiiIiIrlliiIY1897295猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪发热、流产，断奶前、后的仔猪死亡率升高，不同年龄猪呼吸障碍等为临床特征的疾病，它能引起免疫抑制、继发感染及其他疾病的免疫失败等。目前PRRS作为世界性流行病广泛传播于许多国家，已经成为全球兽医界关注的热点问题。我国1996年首次报道本病，关于该病发生、流行以及研究的报告日趋增多。PRRSV基因组易于变异的特性可导致病毒某些生物学特性发生改变，从而增加了该病的控制难

5、度。因此，掌握PRRSV的流行变异趋势对于该病的防治将是十分有意义的。在PRRSV整个基因组中，非结构蛋白Nsp2和结构蛋白ORF5的变异最大，是进行PRRSV分子流行病学研究和病毒遗传变异分析的靶基因。因此，研究PRRSV的Nsp2、ORF5基因的变异具有十分重要的意义。本研究采集河北省2007-2011年问不同地区猪场的临床样本，选取肺脏、脾脏、淋巴结等组织和血清为材料，利用RT-PCR对PRRSV阳性病料中的Nsp2、ORF5基因进行扩增、克隆和序列测定，籍此分析我省近年来PRRSV的变异情况。通过RT-PCR方法，从样本中共获得16个Nsp2和ORF5基因。序列比较结果显示，所获得的

6、16个Nsp2基因之间的核苷酸同源性为94．4％N99．8％，推导氨基酸同源性为88．3‰99．4％；与VR2332株的核苷酸同源性为73％-,74．8％，推导氨基酸同源性为62．3％68．5％；与2005年以前国内PRRSV流行毒株BJ-4、CH．1a、HB．1(sh)／2002、HB．2(sh)／2002相比，所获Nsp2基因与HB．1株的推导氨基酸同源性最高，为87．7％'--93．2％。同时，获得的16个ORF5基因序列的核苷酸同源性为97％99．8％，推导的氨基酸同源性在95‰99．5％之间；与VR2332和LV株的核苷酸同源性分别是87．1％88．6％和55．20／0--．57．

7、7％，推导编码氨基酸的同源性为87．9％'89．1％和62．5％--63．8％；结果表明，所获河北省PRRSV基因序列均属于北美洲型PRRSV，其Nsp2和ORF5基因变异很大。依据所获基因序列及GenBank中国内外代表性毒株相应基因序列推导的氨基酸序列分别绘制PRRSV的遗传进化树。结合Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析显示，全国流行的PRRSV毒株分属于3个亚群，其代表分别为BJ4株、CH-la株和HB-l株，我省流行的PRRSV毒株完全属于同一个亚群III，与2002年分离到的HB-l株亲缘关系最近。关键词：猪繁殖与呼吸征病毒；Nsp2基因；ORF5基因；分子流行病学Investi

8、gationonMolecularEpidemiologyofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirusinHebeiin2007—2011Author：．WangJinfengMajor：．PreventiveVeterinaryMedicineAdvisor．ProfessorSunJiguoAbstractPorcinereproductiveandre