猪繁殖与呼吸综合征病毒论文

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1、猪繁殖与呼吸综合征病毒毕业论文1PRRSV病原学1.1基因组结构PRRSV属于尼多病毒目、动脉炎病毒科、动脉炎病毒属，为一种有囊膜的单股正链RNA病毒，长度大概为15.0kb，其中包括9个开放读码框(openreadingframes,ORFs)。PRRSV的结构蛋白由ORF2~7编码，这些序列编码6个具有帽子结构和poly尾的亚基因mRNA，并且这些mRNA有共同的3’端的亚基因组，形成嵌套式结构，同时它们均获得来自PRRSV基因组5’端非编码区的引导序列[8]（图1-1）。根据基因的差异，PRRSV大致分为北美

2、型和欧洲型。这两种基因型在全世界广泛传播，它们的基因组序列同源性约为40%，两者的血清型明显不同[9]，并且每个基因型的不同分离株同时存在约20%的异源性[10、11]。PRRSV能通过随机突变和基因重组不断演化[12]，其中由ORF5编码的GP5蛋白是变异性最强的结构蛋白，美洲型和欧洲型之间的氨基酸同源性只有50%~55%[13]。1.2PRRSV蛋白ORF1a和ORF1b编码病毒的复制酶蛋白，而结构蛋白由GP2a，GP2b，GP3，GP4，GP5，M和N蛋白组成。其中GP2a，GP3，和GP4是通过二硫键连接形

3、成异源三聚体并且糖基化的小囊膜蛋白[14]。GP5，M和N蛋白为主要结构蛋白，GP5为糖基化蛋白，它在病毒感染上起到了重要的作用；M和N蛋白为非糖基化蛋白，其中M蛋白在病毒的装配和增殖方面起着重要的作用[15]。1.3PRRSV的理化特性5图1-1PRRSV的基因组结构及亚基因组表达模式示意图Fig.1-1SchematicdiagramofthegenomeorganizationandexpressionofPRRSV注：图中标明了复制酶基因（ORFs1a和1b），结构蛋白基因（ORFs2a，2b，3，4，5，

4、6和7）和前导序列(L)。Note:Thereplicasegene(ORFs1aand1b),thestructuralproteingenes(2a,2b,3,4,5,6,and7),andtheleader(L)areindicated.PRRSV对氯仿、乙醚等有机溶剂较敏感。pH高于7或低于5时感染力迅速降低，在pH6.5~7.5之间相对稳定[16]。PRRSV对温度同样表现敏感，经20℃6d,37℃10~24h或者56℃15~20min处理后病毒滴度下降10倍；在37℃48h或56℃45min均能将病毒灭

5、活，因此PRRSV在室温环境中存活时间较短，所以用于分离病毒的血清和组织样品应保存在-20℃或者4℃条件下，以保护病毒的感染性（在4℃存放时间不能超过7d）。2PRRSV致病机制2.1PRRSV的感染巨噬细胞和内皮细胞是PRRSV感染的主要靶细胞。Halbur等[17]认为只要存在巨噬细胞的器官和组织，都有可能导致PRRSV感染的发生。Li等[18]报道高致病性的PRRSV分离株JXwn06有可能向上皮细胞扩散的趋势。已有资料表明，PRRSV首先和猪肺泡巨噬细胞上的受体结合，通过硫酸乙酰肝素(Heparinsulp

6、hate,HS)吸附PRRSV到PAMs,通过唾液酸粘附素(Sialoadhesin,Sn)介导PRRSV的内吞,CD163可能协助Sn内吞、病毒脱衣壳和将基因组RNA释放到细胞质中[19-22]。PRRSV感染后巨噬细胞的大量破坏，以致大为降低其对异物的非特异性吞噬清除功能，同时PAMs依赖于超氧负离子杀菌的功能也随之下降，进而易继发其它细菌和病毒感染机体而加重疾病的症状。研究发病机理的另一个领域是PRRSV和胎儿的相互作用，大约在经过90d5妊娠期后病毒可以穿过胎盘感染胎儿。到目前为止,只有有限的细胞类型能够在

7、体外使PRRSV生长，包括猪原代肺泡巨噬细胞(PAM)、PIMs、MA-104(非洲绿猴肾细胞)和其衍生物(Marc-145和CL-2621细胞系)、CRL-1171细胞系、公猪的睾丸细胞、猪脾巨噬细胞、血液源单核细胞和脑小胶质细胞[23]。PRRSV的分离株不同，使其适合生长的细胞也不同。有些毒株仅生长在一种细胞上,有些则可以生长在多种细胞上。病毒经过5~7代的传代培养后，感染滴度一般为105~107TCID50/mL。PRRSV在细胞中呈杀细胞性复制，引起典型的细胞病理变化(CPE),但也有极个别毒株在细胞上不

8、出现CPE。2.2PRRSV的持续性感染PRRSV的持续性感染是造成严重危害的一个重要特征。有研究结果证明，PRRSV引起的病毒血症在猪群中可持续6~7周，甚至长达16个月。另有研究表明，PRRSV在感染后63~132d都能在扁桃体、淋巴结（肺和非淋巴器官除外）检测到病毒，并且病毒在易感猪群中容易传播，直到260d血清才成为阴性[24]。形成持续性感染的原因