BMSC向神经细胞分化诱导后上清液对MCI大鼠治疗作用的实验研究.pdf

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1、分类号：R743密级：单位代码：10114学号：200930669BMSC向神经细胞分化诱导后上清液对MCI大鼠治疗作用的实验研究研究指导教师：奎迸塞塾援申请学位门类级别：医堂亟±(抖堂堂焦2专业名称：被经痘堂研究方向：王细胞量耋玺疸苤所在学院：出酉医型太堂筮三!逝废医堂瞳2011年3月15日llIIIIIIIIIIIIIIIIIIllllllllllllllllllY2126546学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也

2、不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授予的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：日期：竺!三年—二月二L目学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大

3、学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。论指日期：兰：!年二月旦日同期：兰!!年二月旦日(本声明的版权门山砖医科火学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用)目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．III英文缩略语(ABBREVIATIoN)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．V前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1刖青⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、l第一章BMSC的分离培养、传代培养及鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．6第二章BMSC定向诱导分化与鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．82．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．82．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．92．3实验结果⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10第三章实验动物的选择与处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．113．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．113．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．113．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12第四章各组脑组织边缘系统CDK5表达情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．134．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．134．2试验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯134．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．13结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．17参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．19综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．23个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28致

6、谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．29BMSC向神经细胞分化诱导后上清液对MCl大鼠治疗作用的实验研究中文摘要目的：探讨3代、4代、5代大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导后12h上清液对认知功能障碍大鼠的治疗作用。方法：l、大鼠BMSC的分离、培养和鉴定BMSC采用全骨髓贴壁培养法，用流式细胞仪对选取的第3代BMSC，按1D5／mL水平分别置于5个检测管后加入小鼠抗大鼠CD29抗体、CD44抗体、CD34抗体以及用于对照的IgGI和空白对照进行检测。2、细胞爬片和诱导与鉴定分别取第3、4、5代BMSC进行预诱导，具体方法为：六孔板中加入含lmmol／L13ME和20％

7、胎牛血清的L．DMEM培养液。24h后吸弃预诱导液。加入bFGF20ng／mL和10％胎牛血清。后行免疫细胞化学鉴定。3、实验动物的选择与处理3月龄大鼠十只为正常组，Morris水迷宫行隐蔽平台获得实验确立认知功能障碍大鼠标准：平均潜伏期较正常组延长20％以上者定义为认知功能障碍大鼠。15～22月龄大鼠Morris水迷宫行隐蔽平台获得实验筛选认知功能障碍大鼠40只，随机分生理盐水对照组、3代、4代、5代干细胞传代诱导后12小时上清液治疗组并行行为学检测，后分别海马注射生理盐水、三代、四代、五代干细胞传代诱导后12小时上清液3u