超声波复合酶法提取桦褐孔菌多糖的工艺研究.pdf

《超声波复合酶法提取桦褐孔菌多糖的工艺研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2013年3月超声波复合酶法提取桦褐孔菌多糖的工艺研究l5l超声波复合酶法提取桦褐孔菌多糖的工艺研究黎明晴邓愍民李进进宋伟(江西国药有限责任公司，江西南昌330052)摘要：目的：研究超声波复合酶法用于提取桦褐孔菌多糖的效果。方法：采用超声波复合酶法对桦褐孔菌进行处理，以桦褐孔菌提取物中多糖得率和多糖含量为综合评价指标，考察了超声波复合酶法中主要因素对桦褐孔菌多糖提取效果的影响，并通过正交试验确定出最佳工艺条件。结果：超声波复合酶法提取桦褐孑L菌多糖最佳工艺条件：超声时间30min，超声波功率400W，酶解时问40min，酶解温度40~C。结论：超声波复合酶法双

2、重处理可显著提高桦褐孔菌多糖的提取效果。关键词：桦褐孔菌多糖超声波复合酶桦褐孑L菌(Inonotusoblquus)，又名白桦茸、桦癌菌采自吉林长白山地区，经江西省中医药研究院鉴定褐孔菌，属担子菌亚门，层菌纲，无褶菌目，锈革菌科，为锈革菌科真菌桦褐孔菌(Inonotusoblquus)。褐卧孔菌属j，主要分布于俄罗斯北部、北欧、中国2方法与结果黑龙江和吉林长白山、日本北海道等北纬4o。一5O。地2．1多糖标准曲线的制备区J，外表面呈黑色，像碳一般的硬度，内部呈黄褐色采用苯酚一硫酸比色法⋯测定多糖含量。分别精或茶褐色。从16世纪开始，俄罗斯、波兰、芬兰等国家确吸取

3、0．Img／mL葡萄糖标准溶液0．1，0．2，0．3，0．4，的民间就开始食用桦褐孔菌，民间广泛用于防治消化0．5，0．6，0．7，0．8，0．9mL，分别用去离子水补至1．道疾病、肿瘤(胃癌、肠癌及肝癌等)心血管疾病和糖尿OmL，然后，依次加入1．0mL的5％苯酚和5．OmL浓硫病等。桦褐孔菌多糖具有免疫增强功能，在防衰老、抗酸摇匀，以1．0mL去离子水做参比，在室温下放置肿瘤和抗炎等方面都发挥重要作用J。30min后，测定葡萄糖标准溶液在485nm下的吸光度，热水浸提是提取桦褐孔菌多糖最常见的方法，但以吸光度对葡萄糖质量浓度进行线性回归，得到标准较高的温度容

4、易破桦褐孔菌多糖的生物活性。水提法曲线工作方程：A=8．9162X一0．0058×10，r：0．9992。时间长，耗能大，近年来，人们采用超声波技术提取多2．2样品多糖含量测定糖取得了很好的效果j。酶法是一种温和的方法，不分别称取样品多糖10mg，用去离子水溶解，于会破坏多糖的结构，是获得生物活性多糖的高效方法，100mL量瓶中定容至刻度，摇匀，精密吸取2mL于具塞但采用超声波协同复合酶提取桦褐孔菌多糖的报道很试管中，加入1．0mL的5％苯酚和5．0mL浓硫酸摇匀。少，为验证此方法的提取效果，本试验采用正交试验设以1．0mL去离子水做参比，在室温下放置30min

5、后，测计法优化超声波协同复合酶提取桦褐孔菌多糖的最佳定葡萄标准溶液在485nm下的吸光度，代人回归方程条件。为桦褐孔菌多糖的研究及应用提供实验依据。计算各样品多糖含量。l仪器与试剂2．3多糖的提取Sartofius(BS224S型)电子称(北京赛多利斯仪器将桦褐孔菌用粉碎机粉碎，过40目筛，用天平称系统有限公司)；DF一20型流水式中药粉碎机(无锡中取100．Og，加适量水湿润1h，第一次加1O倍去离子水，银机械制造有限公司)；V1700紫外一可见分光光度计第二次加8倍去离子水，超声提取2次，合并两次滤液，(上海荆和分析仪器有限公司)；USaaofius分析天平

6、减压浓缩至适当体积。再加入复合酶利用酶浸提。酶(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；HF～20B聚能式解后的样品溶液于4500r／min离心30min，上清液浓缩循环超声提取机(北京弘祥隆生物技术开发有限公至适当体积，再加入数倍体积的无水乙醇，使溶液中的司)；RE一2000A旋转蒸发器(上海越众仪器设备有限乙醇达到80％，边加边搅拌，低温静置过夜，抽滤，收集公司)；LGIO一2．4A台式高速离心机(北京众益中和生沉淀。沉淀的多糖以10mL去离子水溶解，加入数倍体物技术有限公司)；纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶(北积的无水乙醇，使溶液中的乙醇达到80％，边加边搅京奥博星

7、生物技术有限责任公司)；D一无水葡萄糖拌，低温静置过夜，抽滤，依次用无水乙醇、丙酮、乙醚(上海纯优生物科技有限公司)；水(去离子水)，无水乙洗涤3次，低温干燥至恒重，计算多糖得率和多糖含醇(分析纯)，丙酮(分析纯)，乙醚(分析纯)。桦褐孔量。l52江西化工2013年第1期2．4多糖得率的计算2．5正交设计试验结果与分析：准确称取桦褐孔菌多糖提取率(％)=粗多糖质量(g)／样品质量(g)粉，每份100．Og，按L。(4)正交表设计方案进行试验，×100％讨论超声时间(A)，超声波功率(B)，酶解时间(C)及多糖含量(％)=根据标准曲线回归方程求得的浓酶解温度(D)

8、对提取结果的影响。因素水