复合酶辅助超声波提取沙枣多糖的工艺研究论文

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1、复合酶辅助超声波提取沙枣多糖的工艺研究论文.freelin,酶解温度为55℃,超声时间25min,超声功率400ethodsTheeffectsofdifferentenzymes,.freelolysistemperature,enzymedosage,enzymolysistime,material-eandultrasonictemperatureontheextractionrateofElaeagnusangustifoliaL.polysaccharidealtechnologica

2、lconditione,enzymolysistime40min,enzymolysistemperature55℃,ultrasonictime25min,ultrasonicpoaterial-perature60℃.Intheseconditions,theextractionefficiencyofpolysaccharidepleandpracticable,andcanbeusedfortheextractionofElaeagnusangustifoliaL.polysacchar

3、ide.Keye;ultrasonic;extractionprocess沙枣(ElaeagnusangustifoliaL.)又名香柳、桂香柳、银柳、七里香等,属胡秃子科落叶小乔木或灌木,在西北各省的干旱沙区广泛栽培。据《新疆中草药手册》记载,沙枣能“强壮,镇静,固精,健胃,止泻,调经,利尿”。维吾尔医多用于脾胃虚弱、消化不良、肠炎腹泻等疾病的治疗1。多糖是沙枣的主要组成成分之一2。传统的多糖提取方法为水煮醇沉法,温度比较高,提取率较低。近年来,生物酶技术、超声技术在多糖提取工艺中已引起广泛的

4、关注。研究表明,酶能分解大分子粘多糖成可溶性小分子物质;超声波的次级效应如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合,有利于有效成分的溶出;生物酶提取和超声提取工艺可以明显降低提取温度、缩短提取时间、提高提取产量、节约溶剂,且对提取物的结构和理化性质无影响。沙枣中多糖的酶结合超声提取工艺目前尚无报道。本试验探讨采用复合酶辅助超声法提取沙枣多糖的工艺条件,为制定经济的沙枣多糖制备工艺提供实验依据。1仪器与试药旋转蒸发器RE-52AA(上海亚荣生化仪器厂);K

5、Q-250型超声波提取仪(昆山市超声仪器有限公司);SartoriusBS210S电子天平(北京塞多利斯天平有限公司);SHZ-C型循环水式多用真空泵(巩义市英欲予华仪器厂);722型光栅分光光度计(上海精密科学仪器厂);电热恒温水浴锅(上海医疗器械五厂);DHG-9123A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。沙枣,产地为新疆。纤维素酶(Cellulase,15U/mg)、果胶酶(pecticenzyme,25U/mg),由华美生物工程公司提供。苯酚、浓硫酸、无水乙醇等均为分析纯。

6、2方法2.1沙枣多糖的测定测定方法采用苯酚-硫酸法。准确称取标准葡萄糖20mg于500mL容量瓶中,加水至刻度。分别取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8mL,各以水补至2.0mL,然后加入6%苯酚1.0mL及浓硫酸5.0mL,摇匀,静置10min,室温放置20min后于490nm波长处测吸光值(OD),以2.0mL水按同样显色作为空白,横坐标为多糖含量(μg),纵坐标为光密度值,制作标准曲线。提取液准确稀释一定倍数,吸取1.0mL(相当于10μg左右的多糖),按上述步

7、骤操作,测光密度,以标准曲线即可计算样品中多糖含量。然后计算出沙枣多糖提取率。2.2复合酶辅助超声波提取沙枣多糖的工艺路线去核沙枣→粉碎→水浸→复合酶水解→灭酶→抽滤去杂→超声波处理→离心→旋转蒸发仪浓缩→醇沉→真空干燥→沙枣多糖。2.3复合酶辅助超声波提取沙枣多糖的操作要点2.3.1复合酶提取沙枣多糖取去核沙枣于50℃鼓风干燥箱干燥24h,过40目筛,得沙枣渣粉待用。取干燥后的沙枣渣粉与蒸馏水混合,分别在不同条件下进行恒温酶解,根据单因素试验的结果及其他植物多糖提取积累的经验,选取纤维素酶和果

8、胶酶的不同加酶量、酶解时间、酶解温度为考察因素,各取3个水平,进行L9(34)正交试验设计,不考虑各因素间的相互影响。复合酶提取选取的因素水平设计见表1。表1复合酶提取因素与水平(略)2.3.2灭酶后超声波提取沙枣多糖以最佳酶解条件反应结束后,升温至85℃灭酶,然后进行超声辅助浸提。根据单因素试验结果,多糖提取率主要受超声时间、超声功率、固液比、超声温度4个因素交叉影响。为了全面考虑这4个因素的影响设计了正交试验,选择超声时间、固液比、超声功率、超声温度为考察因素,各取3个水平,进行L9(34)

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