叶绿体的密度梯度离心与观察.doc

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1、叶绿体的密度梯度离心与观察一、背景与原理叶绿体是植物细胞所特有的进行光合作用的细胞器。分离完整叶绿体主要有3个困难：1植物细胞被坚韧的纤维质细胞壁包围。破碎细胞时既要足以打破细胞壁，同时又要保持叶绿体的完整；有时需先酶解细胞壁制备原生质体，再从中分离叶绿体。2、叶绿体中由淀粉积累而成的致密颗粒会在离心过程中使叶绿体破碎。3．匀浆过程中，液泡中贮存的有毒物质（如水解酶等）会释放出来，破坏叶绿体。菠菜和豌豆嫩叶是分离完整叶绿体的极好材料，其细胞中所含的叶绿体较小，而且都能在不积累淀粉和酚类物质的条件下生长。菠菜的叶绿体/湿重比率高，

2、而豌豆容易生长。二、实验目的1．掌握叶绿体的分离技术；2．观察叶绿体的自发荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。三、实验材料、仪器与试剂1．实验材料新鲜菠菜2、实验仪器普通光学显微镜，荧光显微镜，普通离心机和台式冷冻高速离心机等。研钵，剪刀，托盘和玻皿等。