紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C的含量（精）.doc

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1、2011年7月第3期焦作大学学报JOURNALOFJIAOZUOUNIVERSITYɴ.3Jul．2011紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C的含量李元玲1贺龙强2（1．焦作市质量技术监督局，河南焦作；2．焦作大学化工与环境工程学院，河南焦作）摘要：维生素C是一种对人体极为重要的营养物质，基于维生素C溶液的最大吸收波长为246nm，因而建立了一种直接用紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C含量的方法。其线性范围为1．010．0μg/mL，r=0．9998，回归方程为A=0．0551C－0．0063，检出限为0．05μg/mL，样品回收率为99．9

2、%101．2%，相对标准偏差RSD＜5%，具有操作简便、准确、快速、检出限低的特性。用于蔬菜中维生素C含量的测定，结果令人满意。关键词：维生素C；新鲜蔬菜；紫外分光光度法中图分类号：O657．32文献标识码：A文章编号：1008－7257（2011）03－0093－02维生素C，简称VC，是一种水溶性的维生素，广泛存在于新鲜蔬菜中，具有防止衰老、润滑肌肤、增强免疫力等作用，是维持人体正常代谢的必需物质［1，2］1．2实验方法1．2．1标准曲线的绘制1．00、2．00、4．00、6．00、用吸量管分别移取0．00、8．00、10．00mL含维生素

3、C0．1mg/mL的标准溶液于7个洁净、干燥的100mL容量瓶中，用2%偏磷酸溶液稀释至标线，摇匀。以蒸馏水为参比，在λmax=246nm处，用1cm石英比色皿测其吸光度，并以吸光度A为纵维生素C浓度C为横坐标绘制标准曲线。坐标，1．2．2试样的测定取一定量的新鲜蔬菜，冲洗干净，加等量2%偏磷酸溶液，用组织捣碎机捣碎成匀浆，取适量匀浆转至1000mL的容量瓶中，加2%偏磷酸稀释，摇匀。在1000r/min的高速离心机中离心10min，移取离心管上层清液10．00mL，用2%偏磷酸溶液稀释定容100mL容量瓶。以蒸馏水为参比，在λmax=246n

4、m处，用1cm石英比色皿测试样吸光度。。人体缺乏维生素C易得坏血症，所以又称抗坏血酸，它不能在体内合成产生，只能通过合理的膳食而得到。蔬菜6－二氯靛中维生素C的测定方法较多，目前主要有2，酚滴定法光光度法［3］［6］［4］、2，4－二硝基苯肼法［5］、碘量法、萤光分和电化学法［7］等。这些方法各有其特点，但也大都有一定的局限性：如有些方法操作繁琐、费时、苛刻，有些方法则有所需仪器造价高的缺陷。本文在有关文献的基础上［8］，基于维生素C在紫外光谱246nm波长处有一最大吸收峰，进而通过标准曲线法建立了一种蔬菜中维生素C含量的测定方法，与其它方法相

5、比，具有操作简便、准确、快速、检出限低的优点。1．实验部分1．1仪器与试剂752型紫外－可见分光光度计；PHS－3C型酸度计；组织捣碎机；高速离心机；100mL容量瓶；1000mL容量瓶；10mL吸量管；10mL移液管。维生素C储备液（1．0mg/mL）：秤取0．1g（准确至0．1mg）维生素C，用少量2%偏磷酸溶解后转移至100mL容量瓶中，用偏磷酸稀释至刻度，摇匀，即为贮备液，存放于冰箱中；维生素C标准溶液（0．1mg/mL）：将上述储备液稀释10倍后即得0．1mg/mL的维生素C标准溶液；2%偏磷酸溶液；所有试剂均为分析纯。2．结果与讨论

6、2．1最大吸收波长的确定维生素C是六碳的多羟基内酯，是含有烯二醇基的在紫外光区范围内有吸收。取一定浓度的维生化合物，素C溶液至1cm的石英比色皿中，以蒸馏水为参比，在200380nm波长范围内进行扫描，测定最大吸收波长为246nm（λmax=246nm），结果如图1所示。收稿日期：2011－03－18作者简介：李元玲（1968－），女，山东滕州人，焦作市质量技术监督局。94焦作大学学报2011年7月在最佳实验条件下，加入不同量的维生素C，测其吸光度，绘制工作曲线（图2所示）。结果表明，维生素C在1．010．0μg/mL范围内吸光度A与浓度C之间

7、符合朗伯—比尔定律，呈良好线性关系。其回归方程为A=0．0551C－0．0063，r=0．9998，检出限为0．05μg/mL。2．5干扰实验对常见的共存组分进行了干扰实验，结果表明8mg/100g的维生素C存在下，相对误差控制在ʃ5%以内时，允许的共存物的量为：果糖8mg、葡萄糖8mg、KCl、MgSO4、NaHCO3各3mg。因柠檬酸4mg及Na2CO3、此，本法具有较好的选择性，一般蔬菜中存在的物质对实验测定结果无明显影响。图12．2溶剂的选择维生素C溶液在空气中尤其是碱性条件下容易被氧化而变得极其不稳定，为此，样品的前处理至关重要。因为

8、偏磷酸、草酸能够较好地抑制维生素C的氧防止维生素C被氧化而起稳定作用，所以加入偏化酶，磷酸、草酸可以解决体系中维生素C的稳定性问题。实验发现草酸在波长