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《紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C的含量(精).doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、2011年7月第3期焦作大学学报JOURNALOFJIAOZUOUNIVERSITYɴ.3Jul.2011紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C的含量李元玲1贺龙强2(1.焦作市质量技术监督局,河南焦作;2.焦作大学化工与环境工程学院,河南焦作)摘要:维生素C是一种对人体极为重要的营养物质,基于维生素C溶液的最大吸收波长为246nm,因而建立了一种直接用紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C含量的方法。其线性范围为1.010.0μg/mL,r=0.9998,回归方程为A=0.0551C-0.0063,检出限为0.05μg/mL,样品回收率为99.9
2、%101.2%,相对标准偏差RSD<5%,具有操作简便、准确、快速、检出限低的特性。用于蔬菜中维生素C含量的测定,结果令人满意。关键词:维生素C;新鲜蔬菜;紫外分光光度法中图分类号:O657.32文献标识码:A文章编号:1008-7257(2011)03-0093-02维生素C,简称VC,是一种水溶性的维生素,广泛存在于新鲜蔬菜中,具有防止衰老、润滑肌肤、增强免疫力等作用,是维持人体正常代谢的必需物质[1,2]1.2实验方法1.2.1标准曲线的绘制1.00、2.00、4.00、6.00、用吸量管分别移取0.00、8.00、10.00mL含维生素
3、C0.1mg/mL的标准溶液于7个洁净、干燥的100mL容量瓶中,用2%偏磷酸溶液稀释至标线,摇匀。以蒸馏水为参比,在λmax=246nm处,用1cm石英比色皿测其吸光度,并以吸光度A为纵维生素C浓度C为横坐标绘制标准曲线。坐标,1.2.2试样的测定取一定量的新鲜蔬菜,冲洗干净,加等量2%偏磷酸溶液,用组织捣碎机捣碎成匀浆,取适量匀浆转至1000mL的容量瓶中,加2%偏磷酸稀释,摇匀。在1000r/min的高速离心机中离心10min,移取离心管上层清液10.00mL,用2%偏磷酸溶液稀释定容100mL容量瓶。以蒸馏水为参比,在λmax=246n
4、m处,用1cm石英比色皿测试样吸光度。。人体缺乏维生素C易得坏血症,所以又称抗坏血酸,它不能在体内合成产生,只能通过合理的膳食而得到。蔬菜6-二氯靛中维生素C的测定方法较多,目前主要有2,酚滴定法光光度法[3][6][4]、2,4-二硝基苯肼法[5]、碘量法、萤光分和电化学法[7]等。这些方法各有其特点,但也大都有一定的局限性:如有些方法操作繁琐、费时、苛刻,有些方法则有所需仪器造价高的缺陷。本文在有关文献的基础上[8],基于维生素C在紫外光谱246nm波长处有一最大吸收峰,进而通过标准曲线法建立了一种蔬菜中维生素C含量的测定方法,与其它方法相
5、比,具有操作简便、准确、快速、检出限低的优点。1.实验部分1.1仪器与试剂752型紫外-可见分光光度计;PHS-3C型酸度计;组织捣碎机;高速离心机;100mL容量瓶;1000mL容量瓶;10mL吸量管;10mL移液管。维生素C储备液(1.0mg/mL):秤取0.1g(准确至0.1mg)维生素C,用少量2%偏磷酸溶解后转移至100mL容量瓶中,用偏磷酸稀释至刻度,摇匀,即为贮备液,存放于冰箱中;维生素C标准溶液(0.1mg/mL):将上述储备液稀释10倍后即得0.1mg/mL的维生素C标准溶液;2%偏磷酸溶液;所有试剂均为分析纯。2.结果与讨论
6、2.1最大吸收波长的确定维生素C是六碳的多羟基内酯,是含有烯二醇基的在紫外光区范围内有吸收。取一定浓度的维生化合物,素C溶液至1cm的石英比色皿中,以蒸馏水为参比,在200380nm波长范围内进行扫描,测定最大吸收波长为246nm(λmax=246nm),结果如图1所示。收稿日期:2011-03-18作者简介:李元玲(1968-),女,山东滕州人,焦作市质量技术监督局。94焦作大学学报2011年7月在最佳实验条件下,加入不同量的维生素C,测其吸光度,绘制工作曲线(图2所示)。结果表明,维生素C在1.010.0μg/mL范围内吸光度A与浓度C之间
7、符合朗伯—比尔定律,呈良好线性关系。其回归方程为A=0.0551C-0.0063,r=0.9998,检出限为0.05μg/mL。2.5干扰实验对常见的共存组分进行了干扰实验,结果表明8mg/100g的维生素C存在下,相对误差控制在ʃ5%以内时,允许的共存物的量为:果糖8mg、葡萄糖8mg、KCl、MgSO4、NaHCO3各3mg。因柠檬酸4mg及Na2CO3、此,本法具有较好的选择性,一般蔬菜中存在的物质对实验测定结果无明显影响。图12.2溶剂的选择维生素C溶液在空气中尤其是碱性条件下容易被氧化而变得极其不稳定,为此,样品的前处理至关重要。因为
8、偏磷酸、草酸能够较好地抑制维生素C的氧防止维生素C被氧化而起稳定作用,所以加入偏化酶,磷酸、草酸可以解决体系中维生素C的稳定性问题。实验发现草酸在波长
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