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1、卡托普利及SNP对VSMC中ET-1释放的作用2010-01-14丛洪良 黄体钢 周丽娟 宋昱 马向虹 王伟 刘洪梅 【摘要】 目的 探讨卡托普利及SNP对培养的大鼠VSMC释放ET-1的影响及相互关系。方法 在大鼠VSMC培养液中置入不同浓度卡托普利及/或SNP后,用放免法测定ET-1。结果 卡托普利及SNP均可减低因AngⅡ引起VSMC分泌增加的内皮素量,AngⅡ水平与VSMC分泌ET-1量呈正相关。结论 ET-1通过抑制VSMC内源性NO的产生加速AS的发生及发展,ACEI或NO抑制ET-1释放,可减缓AS形成。 【关键词】 卡托普利 硝普钠 内皮素 一氧化氮 血管
2、平滑肌细胞Thereleasingeffectedofcaptoprilandsodiumnitroprussideonendothelin-1invascularsmoothmusclecell CongHongliang,HuangTigang,ZhouLijuan,etal.TianjinCardiovascularInstitute,Tianjin300211 【Abstract】 Objective InvestigatingtheinfluenceofcaptoprilandSNPonreleasingET-1inculturedVSMCofrat.Method
3、s Measuringtheendothelin-1levelthroughradioimmunologyassayinvariousconcentrationofcaptopriland/orsodiumnitroprussideinculturedvascularsmoothmusclecellofrat.Results TheresultsshowthatbothcaptoprilandSNPcouldreducingthehighET-1levelofVSMCwhichwerecausedbyAngⅡ.Therewerealinearrelationshipbetwe
4、enAngⅡlevelandET-1production(r=0.7601,P<0.001).Conclusion Endothelin-1maybeacceleratingtheatherosclerosisformationanddevelopingthroughinhibitingendogenousNOproducedbyVSMC.ACEIorNO,inhibitingET-1release,mayreduceatherosclerosisformation. 【Keywords】 CaptoprilSodiumnitroprussideEndothelin-1Ni
5、tricoxideVascularsmoothmusclecell 血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)已被公认为高血压、冠心病有效药物之一,并已广泛应用。硝普钠(SodiumNitroprusside,SNP)为血管扩张剂,由于在体内产生NO,被认为是一种NO供体。NO抑制血小板聚集、血管平滑肌细胞(VSMC)增生及白细胞对内皮细胞(EC)粘附,对限制动脉粥样硬化(AS)的局部血管损伤起重要作用[1]。但ACEI及一氧化氮(NO)对局部损伤所起的保护作用是否与VSMC释放的内皮素(ET-1)减少有关,尚少见报道。本研究的目的是探讨卡托普利及SNP对培养大鼠VSMC释放ET-
6、1的影响及相互关系。材料与方法 1.大鼠VSMC培养、鉴定与分组 大鼠VSMC培养为组织贴块法[2]。应用透射电镜鉴定VSMC,待VSMC长满呈亚融合状,消化成细胞悬液铺24孔板,每孔为3.1×104细胞数,于CO2孵育箱静置48小时,弃上清液,设定每六孔为一组。实验组分别予以含AngⅡ80pg/mL、160pg/mL、320pg/mL、640pg/mL,AngⅡ640pg/mL+卡托普利100μg/mL,AngⅡ640pg/mL+卡托普利100μg/mL+SNP10-5mol/mL及加入含SNP10-5mol/mL的M199培养液;对照组加入正常M199培养液。CO2孵
7、育箱孵育36小时后取细胞培养液进行鉴定。 2.主要试剂及测试盒 AngⅡ粉剂(购自北京同正生物技术公司),ET-1放免分析药盒(购自北京东亚放免所)。ET-1测定,此方法是采用均相竞争法直接测定血浆或组织中的ET含量。取培养液100μL与125I-ET、PR-试剂混匀37℃放置15分钟后,3000转/分,20分钟离心,吸弃上清液,在r计数器上测定沉淀cpm数,以Bi/Bo(%)为纵坐标,以ET标准浓度为横坐标,125I-ET与标准或样品竞争性地与ET-抗体结合,根据样品管中放射性含量直接从标准曲线上
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