mirna-145对shr动脉vsmc的表型调控作用及其机制研究

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1、万方数据中图分类号UDC博士学位论文学校代码￡堕乏2密级玺盘miRNA-145对SHR动脉VSMC的表型调控作用及其机制研究TheregulationandmechanismofmiRNA·-145onphenotypeofarterialvascularsmoothmusclecellsinspontaneouslyhypertensiverats作者姓名：嵇利亚学科专业：临床医学研究方向：内科学学院(系、所)：湘雅二医院指导教师：姜德谦教授论文答辩日期么丝年—￡月』日答辩委员会主席中南大学二。一三年五月万方数据原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研

2、究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：盈牲日期：勿生乙年』月』学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全

3、文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。期：赳乒年上月均万方数据摘要miRNA一145对SHR动脉VSMC的表型调控作用及其机制研究第一部分miR-145在SHR动脉VSMC中的表达及细胞表型测定目的：(1)观测miR-145在8、12、16、20周(w)龄SHR胸主动脉VSMC中的表达的情况，并分别与相同周(W)龄Wistar大鼠相比较(2)检测VSMC的细胞表型标志a．SMA和SMemb在8、12、16、20W龄SHR胸主动脉VSMC中的表达的情况，并与Wistar大鼠相比较：(3)分别测量8、12、16、20W末SHR和Wistar大鼠的动脉收缩压(SAP)、动脉

4、舒张压(DAP)和平均动脉动脉压(MAP)，并相互比较；(4)测量8、12、16、20W末SHR和Wistar大鼠的胸主动脉中膜厚度(MT)、中膜面积(WA)／t为腔面积(LA)百分比，并相互比较；(5)作不同周龄SHRmiR-145相对表达量与对应周龄的MT和SAP的相关性分析。方法：Real-timePCR法检测miR-145在不同周龄SHR和Wistar大鼠胸主动脉VSMC中的表达；Real-timePCR法和Western-blot法检测VSMC的表型标志Q—SMA和SMemb的mRNA和蛋白在SHR和Wistar大鼠胸主动脉中的表达情况；ALC．NIBP无创血压测量

5、分析系统测量不同周龄SHR和Wistar大鼠的血压；HE染色切片观测胸SHR和Wistar大鼠的胸主动脉VSMC的形态、中膜厚度(MT)、中膜面积(WA)／内腔面积(LA)百分比。万方数据结果：(1)SHR的miR-145的相对表达量明显低于Wistar大鼠(pO．05)；(2)S腿的O【．SMA的mRNA和蛋白相对表达量明显低于Wistar大N(p

6、相对表达量明显高于Wistar大鼠(∥O．05)；随SHR周龄的增加Q．SMA的mRNA和蛋白相对表达量逐步下降(∥O．05)，而SMemb的mRNA和蛋白相对表达量逐步增加(∥O．05)，但16周后组内比较差异无统计学意义；不同周龄Wistar大鼠的Q．SMA和SMemb的mRNA和蛋白相对表达量无明显差异(p>O．05)；(3)SHR的SAP、DAP、MAP明显高于Wistar大鼠(／7<0．05)且随周龄增加逐步增高(∥O．05)，16周后血压增加达高峰，此后维持在这一高水平；Wistar大鼠血压在正常范围内，不随周龄增加逐步增高；(4)HE切片观察，SHR主动脉壁明显

7、比Wistar大鼠增厚，平滑肌细胞层增多，排列紊乱，弹力纤维明显扭曲，且随周龄增加，平滑肌细胞层也逐步增多；而Wistar大鼠各弹力纤维层排列整齐有序；经测量SHR的MT、WA／LA均比Wistar大鼠增加(p<0．05)，且有随周龄增长而增加的趋势；不同周龄Wistar大鼠MT、WA／LA差异无统计学意义(p>O．05)；(5)相关分析提示：SHR的miR-145相对表达量与其血压和万方数据MT呈明显负相关(萨O．01)。结论：(1)miR-145在SHR和Wistar大鼠胸主动脉VSMC中均有表达；