文献精读模板课件.pptx

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1、分析两种互补的人巨细胞病毒BECN1/Beclin1结合蛋白抑制自噬的作用AnalysisoftheroleofautophagyinhibitionbytwocomplementaryhumancytomegalovirusBECN1/Beclin1-bindingproteins1自我介绍2文章特色3内容及观点4启发与体会CONTENTS01自我介绍02文章特色人巨细胞病毒在感染早期激活自噬，随后抑制自噬，其中两种蛋白质——TRS1和IRS1，在抑制自噬方面发挥作用。本文利用病毒重组技术研究了TRS1和IRS1作为HCMV自噬调控因子的

2、机制。ImpactFactor:11.10003内容及观点自噬自噬是指从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜形成自噬体，与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物。自噬主要参与细胞内大分子物质的循环及再利用、受损细胞器的清除，在维护细胞内环境稳态方面起重要作用。Introduction人巨细胞病毒(HCMV)人巨细胞病毒（humancytomegalovirus）是一种普遍存在的机会性病原体，为疱疹病毒组DNA病毒。HCMV在我国广泛流行，在大多数免疫正常个体呈无症状感染，而在免疫抑制个体、胎儿和婴幼儿可出现明显病症。在孕妇中，原发

3、或新的HCMV感染均可引起新生儿宫内感染或围产期感染，导致胎儿畸形，智力低下或发育迟缓等。真核细胞翻译起始因子2AK2（EIF2AK2/PKR）真核细胞翻译起始因子2AK2(EIF2AK2)最初发现是一个病原识别分子，其N末端能和双链RNA结合诱导C末端催化区域活化。该蛋白可以限制病毒和细胞的mRNA在培养细胞中的翻译过程。IntroductionBeclin1基因也称BECN1基因，是酵母自噬基因ATG6的同系物，也是哺乳动物参与自噬的特异性基因。BECN1是目前唯一被证实的哺乳动物“自噬基因”，是自噬的直接执行者。BECN1基因Cell

4、sandvirusPlasmidsPharmacologicalmodulatorsofautophagy（自噬的药理调节剂）AntibodiesMaterialsCoimmunoprecipitationassaysImmunoblotanalysisImmunofluorescenceanalysisOptimizedautomatedquantificationofGFP-LC3dotsbyhighthroughputmicroscopy（优化自动定量的高通量显微镜检测GFP-LC3斑点）VirusproductionMethodsL

5、entiviraldeliveryofshRNAStatistics01020304050607Results1_IRS1和TRS1均抑制饥饿诱导的自噬Figure1.Inhibitionofstarvation-inducedautophagybyectopicexpressionofTRS1andIRS1.Results2_IRS1和TRS1独立于EIF2AK2抑制自噬Figure2.IRS1andTRS1inhibitautophagyindependentlyofEIF2AK2.Results3_IRS1和TRS1通过其N端结构域与

6、BECN1相互作用来抑制自噬Figure3.IRS1interactswithBECN1andinhibitsautophagyviaitsN-terminalregion.Results4_IRS1和TRS1均参与了感染过程中自噬的控制Figure4.IRS1andTRS1areinvolvedintheinhibitionofautophagyafterHCMVinfection.Results5_缺乏BECN1结合域的TRS1突变病毒不能控制自噬Figure5.TheBECN1-binding-deficientTRS1mutantv

7、irusdoesnotinhibitautophagy.Results6_TRS1突变的HCMV重组病毒与BECN1结合失效，但不存在生长缺陷Figure6.CharacterizationofaHCMVrecombinantviruscontainingamutationinTRS1thatabrogatesbindingtoBECN1.Results7_自噬的抑制使病毒的产量减少Figure7.AutophagyaffectsHCMVinfection.04启发与体会这篇文献证明了HCMV依赖于病毒蛋白的合成可以阻止自噬体的形成和成熟。

8、之前已发现病毒蛋白TRS1具有抗自噬功能，而与TRS1有同源区域的IRS1也可以减少自噬体的积累。根据几个自噬活性的参数，我们证明了饥饿和感染细胞的自噬同时受TRS1和IRS1蛋