分析化学色谱联用分析法课件.ppt

《分析化学色谱联用分析法课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、色谱联用分析法两种色谱联用（色谱-色谱）分析法色谱与质谱、波谱联用的分析方法提高分离能力提高定性能力色谱-质谱、波谱联用分析法将分离能力很强的色谱仪与定性、定结构能力很强的质谱或光谱仪器通过适当的接口(interface)相结合成完整的分析仪器，借助计算机技术进行物质分析的方法。第一节色谱－质谱联用分析法主要包括气相色谱－质谱联用GC-MS高效液相色谱－质谱联用HPLC-MS毛细管电泳－质谱联用CE-MS一、气相色谱－质谱联用（一）原理由于GC的试样呈气态，流动相也是气体，与质谱仪的进样要求相匹配，故最容易将这两种仪器联用。分离试样中各组

2、分，起着样品制备的作用气相色谱仪接口起着气相色谱和质谱之间适配器的作用质谱仪气相色谱仪的检测器计算机系统获得色谱和质谱数据，进行数据采集和处理（二）气相色谱－质谱联用仪器主要由色谱单元、质谱单元和接口三大部分组成接口装置的作用将色谱与质谱联接起来，以除去载气、降低气相色谱仪柱后流出物的气压，同时对试样起富集的作用，并把组分送到质谱仪的离子源。1．接口(interface)实现联用的关键GC-MS对接口的一般要求是：①能使色谱分离后的各组分尽可能多地进入质谱仪，并使载气尽可能少地进入质谱系统。②维持离子源的高真空。③组分在通过接口时应不发生

3、化学变化。④接口对试样的有效传递应具有良好的重现性。⑤接口的控制操作应简单、方便、可靠。⑥接口应尽可能的短,以使试样尽可能快速通过接口。GC-MS的接口有直接导入型和浓缩型直接导入型装置结构简单，容易维护，但它无浓缩作用喷射式浓缩型接口具备去除载气、浓缩样品的功能，即具有分子分离的能力2．质谱单元GC-MS中的质谱应满足下列要求：真空系统不受载气流量的影响灵敏度和分辨率与色谱系统匹配扫描速度与色谱流出速度相适应（1）离子源电子轰击源（EI）是GC-MS中最常用的离子源优点：①谱图重现性好②有较多的碎片离子，提供丰富的结构信息③灵敏度高化学

4、电离源（CI）也是GC-MS配置的离子源之一（2）质量分析器四极质量分析器扫描速度快，并可从正离子到负离子检测自动切换，而且灵巧轻便，价格便宜，是GC-MS中最流行的质量分析器。离子阱质量分析器飞行时间质量分析器3．色谱单元用于GC-MS色谱系统应该符合质谱仪的一些特殊要求。主要是：①固定相应选择耐高温，不易流失的固定液，最好用键合相。②载气应不干扰质谱检测，一般常用氦气。（三）气相色谱－质谱分析的应用GC-MS联用分析的灵敏度高，适合于低分子化合物(相对分子质量＜1000）的分析，尤其适合于挥发性成分的分析。在药物的生产、质量控制和研究

5、中在中药挥发性成分的鉴定食品和中药中农药残留量的测定体育竞赛中兴奋剂等违禁药品的检测环境监测二、高效液相色谱－质谱联用（一）原理以高效液相色谱为分离手段，以质谱为鉴定和测定手段，通过适当接口(interface)将二者联接成完整仪器。（二）高效液相色谱－质谱联用仪器1．高效液相色谱－质谱接口和离子化接口装置必须既能满足液、质两谱在线联用的真空匹配要求，又能实现被分析组分的离子化。离子化方式有两种：试样在离子源中以气体形式被离子化是从固体表面或溶液中溅射出带电离子大气压离子化--最常用电喷雾离子化（ESI）大气压化学离子化(APCI)大气压

6、光离子化(APPI)（1）电喷雾离子化接口电喷雾离子化是将溶液中试样离子转化为气态离子的一种接口带电液滴的形成溶剂蒸发和液滴碎裂离子蒸发形成气态离子电喷雾接口示意图电喷雾离子化过程示意图HPLC-ESI-MS谱图主要给出准分子离子的相关信息，例如在单电荷情况下的[M+H]+、[M+Na]+、[M－H]等，对于生物大分子如蛋白质、肽等，还能产生大量的多电荷离子。ESI常用于强极性、热不稳定化合物及高分子化合物的测定。ESI的主要缺点是只能允许非常小的流动相流量。（2）大气压化学离子化接口大气压化学离子化接口将溶液中组分的分子转化为气态离子

7、的一种接口APCI适用分析有一定挥发性的中等极性与弱极性，相对分子质量在2000以下的小分子化合物。最大优点是使HPLC与MS有很高的匹配度,允许使用流速高及含水量高的流动相，极易与RP-HPLC条件匹配。与ESI相比，APCI对流动相种类、流速及添加物的依赖性较小。（2）质量分析器四极质量分析器离子阱质量分析器飞行时间质量分析器串联四极质量分析器--使用较广泛将三个四极质量分析器串联起来使用第一个四极质量分析器进行质量分离第二个四极质量分析器--碰撞池，产生产物离子产物离子由第三个四极质量分析器分离分析串联四极质量分析器能够进行选择反应

8、监测，选择性更高，使用串联四极质量分析器的质谱称为串联质谱。3．色谱单元HPLC-MS中的色谱柱一般短柱，以缩短分析时间，最常用的固定相为ODS。HPLC-MS对流动相的基本要求是不含非挥发性