蛋白质纯化实验设备.doc

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1、蛋白质纯化实验设备工欲善其事，必先利其器。对照一下，你的实验室还缺那些？（1）超声波细胞破碎机适用于5－100g湿菌体超声破碎，实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。（2）高压匀浆机大规模生产用，对菌体量无限制。破菌效果好，但要注意冷却。（3）高分散乳化机均匀悬浮菌体用，比搅拌快，均匀性好，特别适合于大规模生产。另外，大规模生产时缓冲液的配制很有用，可快速溶解、混匀。推荐品牌：IKA国产品牌：FLUKO；（4）中空纤维超滤柱大规模生产时做菌体收集用，要配合大蠕动泵及压力表。（5）高速冷冻离心机小试、中试菌体

2、收集用，破菌后离心，包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌：BECKMAN、日立、Eppendorf（6）磁力搅拌器搅拌用。缓冲液配制，包涵体溶解等。推荐品牌：国产的都行，最好配4或6工位的。（7）真空泵离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌：MilliporeWP61型。（8）过滤器同真空泵配合使用。推荐品牌：Sartorius烧结金属垫板的不锈钢50mm滤器。（9）pH计缓冲液配制、样品pH调节用。推荐品牌：梅特勒（10）电导仪测定缓冲液及样品的电导。（11）纯水仪如果没有管道系统的纯水设备，那就必需要的了。至少也是要去离子水、双蒸水

3、或三蒸水。推荐品牌：MINIQ(12)紫外可见分光光度计测定蛋白浓度。推荐品牌：Beckman，岛津（13）核酸蛋白检测仪纯化时在线监测。如果不是用AKTA、Bio-Rad之类的高级仪器，就必须要了。（14）蠕动泵简单纯化系统用、包涵体稀释复性。推荐品牌：兰格、GE公司P50。（15）纯化系统高级的纯化系统了。推荐品牌：AKTAexplorer、AKTAPurifier。不推荐bio-rad的DUOFLOW。（16）膜超滤器蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒素用。推荐品牌：MilliporeLabscale、Pellicon（

4、泵可用国产的兰格）（17）蛋白电泳仪SDS-PAGE、Westblot用。推荐品牌：Bio-Rad。（18）脱色摇床电泳染色、脱色用。（19）制冰机破菌时冷却用。（20）恒温培养箱融合蛋白酶切去除tag时恒温用，做ELISA时用。（21）凝胶成像仪给电泳胶及WB拍照片用，要配照片打印机。就是一台数码相机，硬件各品牌没有本质差异，主要看那家的软件做的好，界面友好。（22）电磁炉加热电泳样品。（23）微波炉电泳考染脱色。加热水，溶解尿素、硫酸铵等。（24）微量取样器枪。从1ul到5ml都要的。还有一种电动的，可以用刻度吸管。推荐品牌：Gilson，eppe

5、ndorf(25)超净工作台做蛋白样品的无菌过滤用。（26）冰箱（27）电风扇小量样品的浓缩风干。（28）电子天平两种精度：0.1mg和0.01g。推荐品牌：梅特勒（29）空调蛋白纯化对环境的要求。（30）超声波清洗机缓冲液脱气用，当然也可以采用真空泵抽真空的方法。特别是做疏水层析时，有机溶剂与水相混溶时脱气。（31）酶标仪、洗板机测定蛋白质免疫活性用。特别当我们纯化的蛋白原料含量很低时，SDS-PAGE无法有效监测就必须应用Elisa方法。（32）恒温干燥箱、干烤箱恒温干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗涤后的干燥，设定温度40-60度。干烤箱用于干烤灭

6、菌，内毒素去除等，设定温度180-220度。（33）酸缸做细胞培养常用的那种浸泡容器，对药品级的蛋白纯化要求容器都要用酸缸泡过。（34）UPS电源保护层析设备，防止数据丢失。（35）层析冷柜/低温冷室4度双门的那种大冷柜，可以把层析柱放进去，对温度敏感的蛋白纯化需要。冷室作用同上，更彻底，只是运行费用更大。（36）冷冻干燥机（器）蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。