糖化血红蛋白G7应用及常见问题课件.ppt

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1、G7应用及常见问题样本采集全血样本EDTA抗凝/肝素抗凝样本量：至少1ml进样前注意颠倒混匀稀释血样本稀释液：蒸馏水/溶血素清洗液稀释比例：50ul末梢血＋1ml稀释样本量：至少400ul定标要求日标本量小于100，每周定标一次日标本量大于100，每日定标一次质控失控时更换层析柱后维修后步骤复溶定标液输入定标液浓度定标品的放置『CALIB』“START”报告的阅读（一）报告的阅读（二）报告的阅读（三）2006调查明细故障时采取措施色谱图确认所有样本单个样本特殊情况系统问题样本问题系统问题色普图检查要点参数检查要点1校准因子

2、（A+B）2峰(1)是否锐利？3峰(2)峰数量4峰(3)出峰时间5AreaTotalAreaT-Area极度低层析情况：・T-Area低于50检查要点：・样本量・W/H溶液量・管道堵塞・泵问题（包括洗脱液不足及漏液）・样本针问题T-AREA过低层析情况・T-Area低于500检查要点・样本体积不足・贫血・管道堵塞・如果较多样本T-AREA都低,需检查参数和样本针・可接受的T-Area是：500～2500T-Area过高层析情况・T-Area高于2500检查要点・sA1c的值太高了，因为超出检测范围・较多样本都是高T-Are

3、a,需检查一下参数设置・只有某几个样本T-Area高,需执行稀释程序・可接受的T-Area是：500-2500检测错误层析情况：・sA1c未检测出检查要点：・图谱显示T-AREA过低，但是数据显示正常・由于泵或其他原因，SA1C出峰时间变化.・检查缓冲液位置出现未知峰P00(1)层析情况：・A0出峰时间正常，但sA1c出峰时间异常检查要点：・系统稳定问题.（预热未完成）・进样过滤器堵塞・螺线管阀门异常・缓冲液问题(是否浓缩？)・只有少数样本出现这种情况，考虑变异Hb.出现未知峰P00(2)层析情况：・A0峰之后出现P00峰

4、.检查要点：・检查层析柱的出口连接管.并重新连接・可能存在注射器阀门噪声・只有少数样本出现这种情况，考虑变异Hb.层析柱老化层析情况：・所有样本分离均不好.(sA1c的峰较宽或者被分离了.)检测要点：・在本案例中sA1c峰裂开/离散,sA1c值很低・需更换层析柱・只有少数样本出现这种情况，考虑变异Hb出峰时间过快（1）层析情况：・所有出峰时间均太快检查要点・检测实际流速.（1.425～1.575ml/min）可接受的出峰时间.ｓA1c：0.69～0.75（STD)A0：0.93～0.96（STD)出峰时间过快（2）层析情况

5、：・A0出峰时间正常，但sA1c出峰时间异常.检查要点：・系统稳定问题.（预热未完成)・进样过滤器堵塞・螺线管阀门问题・缓冲液问题(是否浓缩？)・只有少数样本出现这种情况，考虑变异Hb出峰时间过慢（1）层析情况：・所有出峰时间均慢.检查要点：・检查层析柱和过滤器是否漏液・检查进样过滤器是否堵塞・检查控制阀门・检查流速（1.425～1.575ml/min）出峰时间过慢（2）层析情况：・仅sA1c出峰慢检查要点・进样过滤器是否堵塞・添加缓冲液No1或No2・螺线管阀门问题・排气单元问题HbF过高原因・在一些贫血样本中,HbF相

6、对正常样本含量升高但HbF的临床意义是不确定的・在一些高HbF样本中,你应该运用以下公式计算sA1c的值.HbF>10%时sA1c不可报告。计算方法sA1cAREA÷（T-Area-HbFAREA)×FactorA+(-）BA1a、A1b过高原因・受血浆蛋白的影响・层析柱工作条件未达到在层析柱温度未升高到规定时相应对策・轻微离心后取红细胞・等待层析柱达到室温sA1c值过低原因・低血糖・贫血・变异Hb・胰岛素瘤sA1c值过高原因・高血糖・图谱Y轴最大显示为15%.・样本超过15%的sA1c，不能打印完全・但是sA1c的值计算

7、正确泵压力过高现象・色谱是好的,但泵压力超过8Mpa.检查要点・过滤器堵塞(使用超过400测试)・层析柱老化・管路堵塞Pressure现象・色谱图是好的，但泵压力低于4Mpa.检查要点・可能有漏液情况（层析柱进口、出口,过滤器等)泵压力过低Pressure故障排除摘要1.检查T-Area:500～25002.检查出峰时间sA1c:0.69-0.75（STDMODE)Ａ0:0.93-0.96（STDMODE)3.检查压力:5.0～8.0MPa4.检查峰形:sA1c必须锐利，分离出6个Hb成分变异血红蛋白(1)变异血红蛋白由异

8、常α链和/或β链组成(大多数是Hb氨基酸的改变)典型例子是HbS引起溶血性贫血Hb氨基酸的改变导致了其结构和表面电荷的改变通过HPLC法获得异常的色谱图影响HbA1c的检测结果变异Hb模型(1)A1cA0A1cA0A1cA0VHｂ-A1cVHｂ-A1cVHｂ-A0VHｂ-A0正常色谱图典型的变异Hb色谱