流式细胞术在白血病和淋巴瘤中应用课件.ppt

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1、流式细胞术在白血病、淋巴瘤免疫分型中的应用免疫分型的作用区分淋系、髓系白血病区分淋系白血病中的T、B-ALL鉴定混合细胞性白血病的类型：T-M、B-M、T-B、T-B-M于治疗过程中监测MRD，评价疗效提示某些遗传学异常：CD56+APL---t（11；17）？CD19+AML---t（8；21）（q22；q21）？提示预后：CD7、CD11b、CD56等阳性的AML患者预后不良CD15阳性的AML患者CR率高免疫分型的原理正常造血细胞白血病细胞抗原表达遵循系列保守性出现抗原跨系表达髓系:CD33+,T系:CD7+髓系:

2、CD33+CD7+抗原表达有一定的时序性出现抗原时序混乱表达原始细胞:CD34+CD11B-原始细胞:CD34+CD11B+各阶段细胞按一定的比例分布出现分化阻滞原幼细胞<5%原幼细胞>20%免疫分型需要掌握什么理论知识？正常造血细胞的抗原表达规律不同系列的细胞表达的抗原？同一系列不同阶段的细胞表达的抗原？每种抗原的表达强度？正常B系细胞分化图源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》正常T系细胞分化图源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》正常粒细胞分化图源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》正常单核细胞分化图源于王建中等编著

3、的《临床流式细胞分析》免疫分型中的重要抗原CD45正常成人骨髓标本成熟粒细胞：约占40-60%，表达CD11b、CD13、CD33、CD15、CD16、CD10、CD64,不表达CD34、HLA-DR、CD14、CD117有核红细胞：<50%,表达GPA成熟单核细胞：约占2-8%，表达CD11b、CD64、CD14、HLA-DR，不表达CD34、CD117成熟淋巴细胞：约占20-40%T细胞：表达CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7,不表达CD10、CD34、TDT等B细胞：表达CD19、CD20、CD22，不表

4、达CD10、CD34、TDT等NK细胞：CD3-(CD16+CD56)+正常幼稚B细胞：<5.0%,表达CD10、CD19、CD22、弱表达CD20，少量CD10stCD34+TDT+幼稚髓系细胞：〈5.0％免疫分型常用的抗体AMLCD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO怀疑M6加做CD71、GPA怀疑M7加做CD61、CD41B-ALLCD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aT-ALLCD34、

5、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、HLA-DR、CD1a、TDT、cCD3NK细胞CD16、CD56、CD57浆细胞CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56免疫分型的步骤一第一步：初筛，初步筛选白血病类型CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑为T-ALLCD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑为AML伴CD7+CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑

6、为B-ALLCD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑为B-ALL伴CD33+CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑为AML伴CD19+CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑为AMLCD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑为APL免疫分型的步骤二第二步：确诊，进一步确定白血病类型，并且将某一系别的白血病根据分化程度的不同再分为不同亚型根据初筛结果加做其他系别特异性标记T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、TDT、c

7、CD3B-ALL:CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aAML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,怀疑M6加做CD71、GPA,怀疑M7加做CD61、CD41B-ALL免疫亚型亚型CD19CD34TdTCD10CyIgSmIgFAB分型earlyB-precursorALL+++（－）--L1、L2CommonB-ALL++++（－）-L1、L2PreB-ALL+－/+++（+）-L1B-ALL+－－－－/+（+）L3T-ALL免疫亚型分型CD7CD2TdTCD

8、3c/mCD1aFAB分型急性早期T前体细胞白血病earlyT-precursorALL+－+－/+-L1、L2胸腺皮质T-ALL+++++L1、L2急性T细胞白血病T-ALL++－+-L1、L2示例：T-ALL初筛CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-示例：AML伴CD7+初筛