食品中菌落总数的测定课件.ppt

《食品中菌落总数的测定课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、项目名称食品中菌落总数的测定实训目标知识目标：1.知道菌落总数测定的原理、食品中微生物污染来源、检测意义能力目标：1.掌握食品中活菌计数的方法2.掌握食品细菌总数的测定报告方式情感目标：1.通过自主操作，在完成工作任务的过程中不断思考学习，自我构建知识体系。2.通过项目教学，培养学生互作合作的团队精神。学习内容：1.样品处理2.检样稀释3.接种培养4.菌落计数5.结果报告重点：检测流程、检样稀释难点：菌落计数结果的报告具体要求：1.采集足够数量具有代表性的样品并均质制备成均匀稀释液。2.做10倍递增稀释液，稀释准

2、确3.根据对样本污染情况估计，选择3个适宜的稀释度，并使细胞在培养基中充分分散开4.根据GB4789.2-2010要求对菌落总数报告学生基础要求：1.具备无菌操作理念2.熟练使用平皿和接种工具实训材料与仪器：水浴锅，吸管，三角瓶，无菌水，灭菌培养皿，试管，平板计数琼脂培养基项目实训任务单食品中菌落总数的测定描述不同种类、不同生长状态的微生物生长情况，需选用不同的测定指标。（一）微生物细胞数目的检测法直接法（血球计数板法）间接法（平板菌落计数法）（二）微生物生长量和生理指标测定法直接法（干重法，测体积法）间接法（比

3、浊法，生理指标法）样品菌悬液计数板镜检利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。菌落在固体培养基上，由一个细胞或多个同种细胞不断分裂繁殖所形成的肉眼可见的子细胞的群体。菌落总数：是指一定量被检样品中所含细菌菌落数目的总和。返回3454原辅料1加工2运输3贮藏4销售5食品加工流程微生物污染来源土壤人及动物体水空气加工机械与设备污染途径外源性污染内源性污染包装材料食品中菌落总数的测定，目的在于了解食品生产中，从原料到加工成品包装受外界污染的情况，也可以了解微生物在食品中的繁殖动态，确定食品保存期，有

4、利于对样品进行微生物质量安全卫生状况评价提供依据。食品腐败变质一方面，它可以作为食品被污染程度的标志。许多实验结果表明，食品中菌落总数能够反映出食品生产过程的一般卫生状况、新鲜程度以及是否变质等。一般来讲，食品中细菌总数越多，则表明该食品污染程度越重，腐败变质的可能性越大。另一方面，它可以用来预测食品可能存放的期限。如实验表明，菌数为105cfu/cm2的鱼，在0℃下可保持6d，而菌数为103cfu/cm2时，保存期可达12d。返回实践操作无菌取样样液稀释样品接种恒温培养结果观察，报告1ml1ml1:10001:

5、10025ml或g样品1:10225ml生理盐水9ml生理盐水9ml生理盐水1:100009ml生理盐水1ml稀释液1ml图解流程无菌生理盐水加入45℃平板计数培养基15ml左右36℃培养48小时计数，报告9ml生理盐水1ml稀释液1mL任务一仪器试剂准备所用器具干净、烘干、灭菌，既不能存在活菌也不能存在抑菌物质。应注意无菌操作。用作样品稀释的液体，应有空白对照。减少样品在稀释时造成的误差，在连续递次稀释时，每个稀释液应充分振荡，每一稀释度对应一吸管。培养基的温度保持45℃左右。琼脂凝固后倒置培养。玻璃器皿平皿可

6、以用牛皮纸或双层报纸包扎成捆，或放入金属筒内再灭菌。内部框架带盖外筒在吸管粗头顶端约0.5cm处，塞上一小段棉花，后用4-5cm宽的报纸将其包好。电热恒温干燥箱----干热灭菌160-170℃1-2h任务二仪器试剂灭菌培养基、生理盐水-----湿热灭菌121℃15-30min任务三样品稀释制备⑴检样处理以无菌操作取经过充分摇匀的检样25mL，放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内做成1:10的均匀稀释液。⑵样品稀释用1mL灭菌吸管,吸取1:10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的

7、试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液),充分振摇试管，使之混合均匀,制备成1:100的稀释液。另取1mL灭菌吸管,按上项操作顺序，作10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1mL灭菌吸管。全过程遵循无菌操作程序，考虑如何满足要求？任务四平板制备选择适宜的稀释样液根据对标本情况的估计,选择3个适宜稀释度,吸取该稀释度1mL稀释液于空平皿内。待培养基冷却至46℃左右，以无菌操作侵入无菌培养皿中。每个平皿倒入约15-20mL培养基，并转动平皿使其混合均匀。后放至水平面上自然冷却凝固，切勿随意晃动而使培养基表面

8、不平整影响涂布操作。从样品稀释到平板制备要求在15min内完成。任务五、培养计数待琼脂凝固后,倒置平板,置36±1℃温箱内培养48+2h。平板取出,计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每g(或mL)样品所含菌落总数。菌落计数以平板内菌落形成单位（CFU）表示。计数原则若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按照公式计算：N=∑C/(n1+0.1n2)dN-样品