实验二、重金属污染对植物叶绿素含量.ppt

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1、实验二重金属污染对植物叶绿素含量的影响实验目的掌握叶绿素含量的测定了解重金属污染对叶绿素含量的影响了解在重金属胁迫条件下的变化趋势实验原理植物叶绿素分叶绿素a和叶绿素b，其含量的高低是反映植物光合作用能力的一个重要指标叶绿素含量的变化可以反映污染对植物光合作用的影响实验仪器与材料仪器：研钵、滤纸、漏斗、5mL移液管、分光光度计等材料：小麦试剂：丙酮（80%）、石英砂、氯化铬（Cd2+）系列溶液（0、5、10、25、50mg/L）实验步骤1：实验材料培养将大小比例均匀的种子用蒸馏水浸泡、吸胀后，移入铺有2层滤纸的培养皿

2、中，置入光照培养箱中培养（22℃～25℃）实验步骤2：分组染毒处理在种子长出2片真叶后，分别用5个不同浓度的重金属氯化铬溶液处理每组3个平行处理实验步骤2：分组染毒处理每天用蒸馏水冲洗1次，再用原组重金属溶液培养培养1周后，即可用实验步骤3：叶片中叶绿素提取取新鲜植物叶片0.1g(5株等长植物)剪碎，放入研钵中，加入80%丙酮2.5mL和少量(3～4粒）石英砂研成糊状，再加3mL80%的丙酮,继续研磨至组织变白实验步骤3：叶片中叶绿素提取在暗处静置3～5min后，用一层滤纸过滤到30mL烧杯中用滴管吸取80%丙酮将研

3、钵和滤纸周围洗脱色素待滤纸和残渣全部变白后，用80%丙酮定容至20mL实验步骤4：测定吸光度先用少量色素提取液清洗比色皿2～3次，然后将色素提取液倒入比色皿中80%丙酮作空白对照在波长分别为663nm、645nm条件下测定提取液的吸光度。如果浓度较高，适当稀释后比色定量。计算叶绿素含量叶绿素a和b及总叶绿素的浓度分别为：Ca、Cb和CT，可根据下式计算：Ca=12.7A663-2.69A645Cb=22.9A645-4.68A663CT=8.02A663+20.21A645式中：A663、A645分别为提取液在波长6

4、63nm、645nm下的吸光度。数据处理与实验结果分析：每个处理组的平行测定结果用平均数±标准误（￣±SE）表示，用One-WayANOVA分析不同处理间的差异性。可Excel做图，展示实验结果并分析。XLet’sdoit!