高效液相色谱-检测器.ppt

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1、高效液相色谱检测器侯建军检测器是高效液相色谱仪的核心部件，他负责把从色谱柱分离出来的各组分快速、准确的检测出来，实现定性、定量分析。检测器的分类1、紫外可见吸收检测器(UV)2、光电二极管阵列检测器(PDA)3、荧光检测器(FD)4、示差折光检测器(RID)5、电化学检测器(ED)6、化学发光检测器(CD)7、蒸发光散射检测器(ELSD)紫外可见吸收检测器(ultraviolet－visibledetector，UV)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器，几乎所有的液相色谱仪都

2、配有这种检测器。属于选择性检测器。1、特点：灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，波长可选，对流动相的流速和温度变化不敏感，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达10-9g/ml以下，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与多种检测器串联使用。工作原理与结构同一般分光光度计相似，也就是装有流通池的紫外可见分光光度计。2、结构与原理：紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm～800nm)。它有两个流通池，一个参比池，一个测量池。光

3、源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，即无信号输出。当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，即有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。可变波长紫外检测器固定波长紫外检测器结构图紫外/可见光检测器的光路系统，由氘灯提供190nm～600nm宽带光谱，光线径直射到全息凹面光栅上，衍射的单色光射到半透射反光镜，被分成两束光线，一束经流通池后照射到测量光电池上，另一束经参比池照射到参比光电池上，光

4、电池把光能量转换成微小电流信号，光栅由一台微机控制的步进电机精确地驱动以改变波长。如图所示：D氘灯光门波长调节杆凹面光栅半透镜流通池光电池（测量）光电池（参比）暗盒单色器光源步进电机半透反光镜检测池参比池光/电转换前置放大器A/DCPU时钟并行口讯号输出(积分/记录)键盘显示屏直流电源变压器交流电源冷却风机《紫外/可见光检测器系统原理图》3、局限：对紫外吸收差的化合物如不含不饱和键的烃类等灵敏度很低。流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶剂不能做流动相。每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外

5、光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，流动相的截止波长不能大于紫外吸收检测器的工作波长。光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector，PDA)光电二极管阵列检测器是紫外检测器的重要进展，也称快速扫描紫外检测器，在液相色谱分析中得到大量的使用，被认为是液相色谱最有发展、最好的检测器。1、特点：灵敏度比紫外检测器高，噪音低，线性范围宽，对流速和温度的波动不灵敏，适用于梯度洗脱及制备色谱。2、原理与结构：检测器的接收是由一组光电二极管（数量由35～1024个不等）接收，并

6、转换为电信号。光电二极管的排列（数字分辨）和狭缝宽度（光学分析）决定了检测器的全波长分析能力。还能获得色谱分离组分的三维光谱色谱图。《二极管阵列检测器光路示意图》氘灯消色差透镜斩光器流通池载液全息光栅二极管阵列检测器在结构上的主要特点是用光电二极管阵列同时接收来自流通池的全光谱透过光，因此在光路安排上与普通紫外/可见光检测器有重要的区别，它让光线先通过样品流通池，然后由一系列分光技术，使所有波长的光在接收器同时被检测，其光学系统又称多色仪，其光学系统被称为“倒光学”系统。三维谱图3、局限：对紫外吸收

7、差的化合物灵敏度很低。流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶剂不能做流动相。二极管阵列少的话波长分辨率和灵敏度较低，商品价格也较贵。荧光检测器(fluorescencedetector，FD)一般包括激发光源、选择激发波长的单色器、检测池、选择发射波长的单色器及检测发光强度的光电转换系统等基本组件。可分为固定波长荧光检测器（用多个率光片作单色器）和荧光分光检测器（用光栅作单色器）两大类。1、特点：灵敏度极高，能达到10-12g/ml，有选择性，可检测能产生荧光的化合物。某些不发荧光的物质可通过化学

8、衍生法生成荧光衍生物，适用于痕量分析。2、原理与结构：由光源发出的光，经激发光单色器后，得到所需波长的激发光。通过检测池的激发光部分被样品吸收，并使其被激发后发射出荧光。在经选择发射波长的单色器分光后，单一波长的发射光被送至光电检测器进行检测。由于吸光强度与激发光强度成正比，光源应具有高强度、连续、平滑、稳定的辐射输出功能。荧光检测器氘灯激发单色器发射单色器光电倍增管光二极管（UV）样品流通池结构图光源检测器滤光片检测室滤光片常见荧光检测器光路图3、局限：只能适合于能