基因工程试卷2.pdf

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1、华中农业大学本科课程考试评分标准考试课程与试卷类型：基因操作原理姓名：学年学期：学号：考试时间：班级：一、填空题（每小题2分，共30分）1.PCR技术应用广泛，以下不属于PCR应用的为___D_____：(A)随机扩增多态性DNA(RAPD)；(B)扩增片段长度多态性(AFLP)；(C)RACE；(D)S1酶作图。2.λ噬菌体线性DNA分子的两端各有一个____12_____个碱基组成的天然黏性末端。3.PCR扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是___B______：(A)退火温度过低；(B)退火温度过高；(C)dNTP浓

2、度过高；(D)循环次数过多。4.下列哪一种酶作用时需要引物____B_____：(A)末端转移酶；(B)反转录酶；(C)DNA连接酶；(D)限制酶。5.Cosmid实际上是由_λ噬菌体__和__质粒_____构成的杂合载体，也可以说是带有__cos__序列的质粒。6.限制性内切酶的命名主要根据__来源菌株属名第一个字母，种名头两个字母以及菌株号、序号_____来确定，以下各种书写方式中哪种或哪几种是正确的____AC____：(A)PstI;(B)KpnI；(C)HindIII;(D)HindIII;(E)Tth111I;(F)Bsp

3、1286I；(G)XbaI7.在分子克隆常用的E.coli菌株中Dam和Dcm甲基化酶都是有活性的，它们可在DNA的特定位点作甲基化修饰。而许多限制性内切酶对甲基化是敏感的，一旦所识别的酶切位点被甲基化就不能切割该位点，如ClaI(AT/CGAT)。请问ClaI不能切割以下哪个或哪些来自dam+dcm+E.coli菌株的DNA序列____C_____。(A)ATCGATA；(B)ATCGATG；(C)ATCGATC；(D)ATCGATT。8.限制性内切酶有其特定的识别位点，如EcoRI的识别位点为___GAATTC___；有些限制性内

4、切酶切割DNA后可产生带有相同末端的DNA产物，这些酶称为同尾酶，例如__BamHI__限制性内切酶与___Sau3AI_________限制性内切酶切割DNA形成的末端相同。（任举一例都可以）9.在基因操作过程中会使用一些多对人体有害的物质,操作时应小心谨慎,常用的有害物质有UVlight、DEPC、____EB___和____苯酚____等。（任举一例都可以）10.根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA文库等。在下列文库中_C_是cDNA文库。(A)YAC文库；(B)PAC文库；(C)扣减文库；(D)BAC文库。11

5、.M13KO7是一种辅助噬菌体，可用它帮助噬菌粒制备单链DNA，这是因为以下原因_B_：(A)M13KO7能够进行滚环复制，得到大量的单链噬菌体DNA；(B)M13KO7能够提供成熟包装的蛋白；(C)M13KO7提供了成熟包装所需的信号；(D)M13KO7的10个基因都是正常的。12.在制作DNA嵌套缺失突变体时主要有3种方法，其核心技术都使用了一种核酸酶，它们分别是__外切核酸酶III__、__BAL31__和___DNaseI___。13.在核酸杂交过程中，一般都要先做预杂交，这是为了__B__：(A)做预备试验，寻找最佳反应条件

6、；(B)封闭背景；(C)使杂交信号更强；(D)减少非特异性杂交信号。14.在许多克隆载体中都使用了-互补机制来做筛选标记，也就是俗称的“蓝白菌落”筛选，在应用过程中使用了两种引起颜色变化的试剂，它们是___x-gal__和____IPTG__。15.在基因操作中有些不同的名称具有相同的缩写，例如RT-PCR,可以是___实时定量PCR__或___反转录PCR___的缩写。二、名词解释（每小题3分，共21分）1．StarActivity(inrestrictionenzymes)星星活性，（1’）极端非标准条件下，限制性内切酶切割与识

7、别序列相似的序列，这个改变的俄特殊性称星星活性。（2’）2．NorthernblottingNorthern杂交，（1’）即DNA与RNA的杂交，与Northern杂交的不同之处在于转移的是RNA而不是DNA。（1’）Northern杂交是转录水平的检测，用于检测样品中是否有与探针同源的mRNA分子。（1’）3．Shuttlevector穿梭载体，（1’）能够在两类不同的宿主中复制、选择和增殖的载体。（2’）4．ChromosomeWalking染色体步查，（1’）采用一段分离自某一重组体一端的非重复DNA片段作为探针，以鉴定含有相邻

8、序列的重组克隆的方法称染色体步查。（2’）5．KlenowfragmentKlenow片段，（1’）大肠杆菌DNA聚合酶经枯草杆菌蛋白酶水解的大片段。（1’）具有5’—3’聚合和3’—5’外切活性。（1’）6．Unive