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时间:2020-10-17
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1、安徽农业大学2008―2009学年第一学期《基因工程原理》试卷(A卷)考试形式:闭卷,2小时,总分100分适用专业: 06生物技术考试时间:2008.11. 题号一二三四五总分得分得分评阅人一大题:填空题(共8小题,每空1分,共20分)1.1970年,Smith和Wilcox从流感嗜血杆菌中分离到第一个Ⅱ类限制性内切核酸酶,这个酶后来被命名为HindⅡ;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是EcoRⅠ。2.Ⅱ类限制性内切核酸酶仅有内切核酸酶活性,而没有甲基化酶活性,作用时需要Mg2+作为辅助因子。3.原核生物主要有两种类
2、型的DNA连接酶:E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。正常情况下只有T4DNA接平末端的双链DNA。4.受体细胞的感受态是接受外源DNA的生理状态,诱导处理E.coli通常采用的化学试剂是CaCl2。5.两个天然质粒pSC101和ColE1分别是严紧型和松弛型个作为重组DNA载体的质粒是PSC1016.pBR322质粒具有四环素和氨苄青霉素两种抗性基因,而pUC系列的载体仅有氨苄青霉素抗性基因。7.在分离提取DNA的过程中,通常使用金属离子螯合剂EDTA,其目的是螯合Mg2+离子,抑制核酸酶的活性;,而使用异戊醇的作
3、用是减少气泡,促进分相1.在Southern印迹中,DNA转移的速度主要取决于DNA片段大小和琼脂糖凝胶浓度。得分评阅人二大题:选择题(每小题1分,共15分)1.因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是(A)。(a)P.Berg(b)W.Gilbert(c)A.Kormberg(d)B.McClintock2.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有(B)不太恰当。(a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成(b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ型限制性内切核酸酶(c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰(
4、d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3.限制性内切核酸酶可以特异性地识别和切割(B)。(a)双链DNA的特异碱基对(b)双链DNA的特异碱基序列(c)特定的三联密码(d)以上都正确4.限制性内切核酸酶的星号活性是指(A)。(a)在非常规条件下,识别和切割序列发生变化的活性(b)活性大大提高(c)切割速度大大加快(d)识别序列与原来的完全不5.下列限制性内切核酸酶中,选用(B)时要考虑连接后外源DNA的插入方向。(a)EcoRⅠ(b)EcoRⅡ(c)BamHⅠ(d)PstⅠ6.下列工具酶中,那一种可以被EGTA抑制活性(
5、B)?(a)S1核酸酶(b)Bal31核酸酶(c)末端转移酶(d)碱性磷酸酶7.用碱法分离质粒DNA时,因为(C)所以可以被除去。(a)染色体DNA断成了碎片(b)染色体DNA分子量大,而不能释放(c)染色体DNA变性后来不及复性(d)染色体末同蛋白质分开而沉淀8.DNA连接酶的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口,(A)。(a)将双链DNA中的5′-P同3′-OH末端重新形成磷酸二脂键(b)作用时不消耗能量(c)需要Mn2+等二价辅助离子(d)也可以连接RNA分子9.关于穿梭质粒载体,下面哪一种说法最正确?(B)(a)在
6、不同的宿主中具有不同的复制机制(b)在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点(c)在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶(d)在不同的宿主细胞中具有不同的复制速度10.关于噬菌斑筛选法的原理,下面哪一种说法不正确?(C)(a)噬菌斑颜色的变化(b)cI基因失活造成噬菌斑的变化(c)对IPTG的分解能力(d)对Xgal的分解与否11.在利用lacZ失活的显色反应筛选中,IPTG的作用是(A)。 (a)诱导宿主的α肽的合成(b)诱导宿主的ω肽的合成(c)作为酶的作用底物(d)作为显色反应的指示剂12.在切口移位标记DNA探针时只能使用(
7、B)。(a)Klenow酶(b)DNA聚合酶Ⅰ(c)T4DNA聚合酶(d)T7DNA聚合酶13.用下列方法进行重组体的筛选,只有(C)说明外源基因进行了表达。(a)Southern印迹杂交(b)Northern印迹杂交(c)Western印迹杂交(d)原位菌落杂交14.用免疫化学法筛选重组体的原理是(D)。(a)根据mRNA同DNA的杂交(b)根据DNA同DNA的杂交(c)根据载体基因的表达(d)根据外源基因的表达15.限制性内切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ在野生型的λ噬菌体DNA中有多个酶切位点,删除这些酶切位
8、点的数量,主要通过(A)。(a)体内突变(b)完全酶切后连接(c)部分酶切(d)先用甲基化酶修饰后再酶切得分评阅人三大题:判断题(每小题1分,共20分)1.DNA多态性就是限制性片段长度多态性。(错)2.在限制与修饰系统中,修饰主要是甲基化作用,一旦位点被甲基化了,其他的限制酶就不能切割了
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