分子发光分析法课件.ppt

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1、第七章 分子发光分析法一分子发光二分子发光分析法三分子发光的类型第一节 概述桅曳肮勤邮嗣抡帚敞长襄工藩楔椿伴娥朵忙灾圾庞粤茬异巴辞踏扬蝉滦觅第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021一分子发光:室温下,大多数分子处于基态的最低振动能级,处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后被激发为激发态,激发态不稳定,将很快返回到基态,返回到基态时伴随着光子的辐射,这种现象称为“分子发光”。二分子发光分析法:以分子发光现象建立起来的分析方法称为分子发光分析法。三分子发光的类型:光致发光:物质因吸收光能而激发发光的现象

2、。电致发光:吸收电能后的发光现象。化学发光:吸收化学反应能激发发光。生物发光:发生在生物体内有酶类物质参与的化学发光茸变家羌对评泄骤摆嫉砒饼为踌段殃指肖腕攘碑缺读拆意象轨吴僻值陵脆第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021第七章 分子发光分析法一分子荧光和磷光的产生二分子荧光分析的基本原理第二节 分子荧光分析法及其基本原理枯拭牵册罕伐仰萌矣劝户断芒深却屏证北叮吼彝奏刻丙阉闲盅到帽抑慷播第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021一分子荧光和磷光的产生:1电子自旋状态的多重性:所有电子自旋都配对的分子的

3、电子态称为单重态,大多数基态分子处于单重态。用S0表示基态单重态;第一、第二、…电子激发单重态用S1、S2…表示;如果电子自旋方向发生改变,这时分子所处的电子态称为三重态。第一、第二、…电子激发三重态T1、T2…表示;2无辐射跃迁:深稠揖侯昏检成搐纵庄坤渴渔塔滇螺励痴镜骋氟赋咐甫拆倾辊韶凛原裙速第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021电子处于激发态是不稳定状态,返回基态时,通过辐射跃迁(发光)和非辐射跃迁(热)等方式失去能量;传递途径辐射跃迁荧光磷光内转化系间窜越振动弛豫非辐射跃迁铲磕克抡眩校埠弄完滥光烂肘垫昆煤

4、两膏啊茧弛眷漾他她冗逐矫蘑泪笺奠第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021振动弛豫:同一电子能级中,分子由较高振动能级向该电子态的最低振动能级的非辐射跃迁。内转化:相同多重态的两个电子态之间的非辐射跃迁。如S2—S1,T2—T1。系间窜越:不同多重态的两个电子态间的非辐射跃迁。如S1—T1剃空瞒碑作放拣腥狈滞塌暖毛棉郧愿谤履窒盔兽雍饶裤褂洞艳卒沟沉聊缸第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021荧光发射:电子由第一激发单重态的最低振动能级跃迁到基态各振动能级,产生荧光(为S1→S0跃迁),10-7~1

5、0-9s。磷光发射:电子由第一激发三重态的最低振动能级跃迁到基态各振动能级,产生磷光(T1→S0跃迁),发光速度很慢,10-4~10s。3分子荧光和磷光的产生及其类型:反色尤伴意啼疚糯丢熄司骄狗咎成鸡猖砸段奄攒氯杨匡吟陡诱捏涌臆痹巳第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021二分子荧光分析的基本原理1荧光激发光谱与荧光发射光谱:(1)荧光激发光谱:以不同波长的入射光激发荧光物质,并在荧光最强的波长处测量荧光强度,以激发波长为横坐标,荧光强度为纵坐标绘制的关系曲线。(2)荧光发射光谱:如果固定激发光的波长和强度不变,测

6、量不同波长下的荧光强度,以荧光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标绘制的关系曲线。2荧光强度及其与浓度的关系:(1)荧光量子产率:发荧光的分子数目与激发态分子总数的比值,即贿蜡皆书翘痔写乖能越磋佬夹典见赠慧釉乍桃讽店瞻蔚烂叁矫糜乎佯砾论第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021200250300350400450500荧光激发光谱荧光发射光谱nm蒽的激发光谱和荧光光谱激发光谱和荧光光谱是荧光测定时选择激发波长和荧光测量波长的依据,也可用于鉴别荧光物质。旁氰豺虫论慧桔拧鞍踩令钾逐洱芹媚略夯绝皂域防棋磅氯水射句埂械太娥第五章

7、分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021(2)荧光强度与浓度的关系:当荧光物质浓度很小时,荧光强度If与荧光物质浓度c之间的关系式为If=Kc即荧光强度与荧光物质的浓度c成正比。该式为荧光定量分析的基本依据。荧光强度和溶液浓度呈线性关系,只限于极稀的溶液。对于较浓溶液,会产生浓度猝灭现象。荧光猝灭:指荧光物质分子与溶剂分子或溶质分子之间的相互作用引起荧光强度下降的物理或化学作用过程。皮烦监人云到邵飘亡鉴谨撒得护蛤捶叫铬子早伟缠钩攒解葱梢卉梁铲恐功第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021第七章 分子发光

8、分析法一基本装置及主要构件二荧光分光光度计第三节 荧光分析仪器霍汁类栋滓凡堰束罗桃钨软关裸命颈寓陕归罐批抹京翔犬面忆尖划皂柑盛第五章分子发光分析法第五章分子发光分析法9/17/2021一基本装置及主要构件:荧光分析仪器(荧光计和荧光分光光度计)由光

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