实验三 食品中硒的测定-原子荧光光谱法.doc

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1、光谱技术在食品分析中的应用实验三食品中硒的测定-原子荧光光谱法一、实验目的1、了解原子荧光光度计仪器的基本结构和原理；2、学会原子荧光光度计的操作技术；3、了解食品中硒的测定意义；4、学会湿法消化样品的操作。二、基本原理利用硼氢化钠作为还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原为硒化氢（SeH2），由载气带入原子化器中进行原子化，在硒特制空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，再去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比，从而定量硒在食品中的含量。三、仪器和试剂1、仪器：AFS-

2、230E型双道原子荧光光谱仪、硒特制空心阴极灯、可调式电热板2、试剂除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水；所用玻璃仪器均需以硝酸（1+5）浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用纯水冲冼干净。硝酸（优级纯）、盐酸（优级纯）、氢氧化钠（5g/L，优级纯）、硼氢化钠溶液（8g/L）、铁氰化钾溶液（100g/L）、硒标准储备液（100μg/mL，光谱纯）、盐酸（6mol/L）、混合酸：将硝酸与高氯酸按9：1体积混合等。硒标准储备液制备（100μg/mL）：称取0.100g高

3、纯硒粉于1000mL容量瓶中，溶于少量硝酸中，加入2mL高氯酸，置沸水浴中加热3h~4h冷却后再加8.4mL盐酸，再置沸水浴中煮2min，用蒸馏水准确稀释至1000mL，摇匀。硒标准应用液制备：取100μg/mL硒标准储备液1.0mL，定容100mL，摇匀备用。硼氢化钠溶液（8g/L）制备：称取8.0g硼氢化钠（NaBH4），溶于氢氧化钠溶液（5g/L）中，然后定容至1000mL。铁氰化钾溶液（100g/L）制备：称取10.0g铁氰化钾（K3Fe(CN)6），溶于100mL容量瓶中，摇匀。载流溶

4、液：5%盐酸水溶液。四、实验步骤1、试样制备在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。①粮食：试样用水洗三次，于60℃烘干，粉碎，储于塑料瓶内，备用。②蔬菜及其他植物性食物：取可食部用水洗净后用纱布吸去水滴，打成匀浆后备用。③其它固体试样：粉碎，混匀，备用。④液体试样：混匀，备用。试样消解电热板加热消解：称取0.5g～2g（精确至0.001g）试样，液体试样吸取1.00mL～10.00mL，置于高脚烧杯中，加10.0mL混合酸及几粒玻璃珠，盖上表面皿冷消化过夜。次日于电热板上加热，并及时补加硝酸。

5、当溶液变为清亮无色并伴有白烟时，再继续加热至剩余体积2mL左右，切不可蒸干。冷却，再加5.0mL盐酸（6mol/L），继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，将六价硒还原成四价硒。冷却，转移至50mL容量瓶中定容，混匀备用。同时做空白试验。2、标准溶液的配制分别取0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL标准应用液于25mL比色管中分别加6mol/L盐酸4mL，铁氰化钾1mL，混匀，用去离子水定容至25mL，待测。3、未知液中硒含量的测定：从容量瓶的样品中移取10.0mL未知液于25m

6、L比色管中，再分别加6mol/L盐酸4mL，铁氰化钾1mL，用二次水稀释至刻度，摇匀，待测。4、打开仪器，设定参数，测定所有待测液的荧光强度，记下数据。五、数据处理以硒含量为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线，求出未知液中硒含量。六、仪器操作步骤1、打开灯室盖，将待测元素的空心阴极灯插入灯座。2、将各种泵管连接好。3、开启气瓶，使次级压力为0.2-0.3MPa之间。4、在确认电源正确后，按断续流动、主机、微机顺序开启电源。5、双击“AFS-230E”原子荧光仪，进入仪器操作系统。6、用鼠标单

7、击“运行”菜单中“点火”项，点燃炉丝，预热30min。7、进行参数设置，并清洗管道。（参数使用仪器厂家推荐值）8、放好样品管中的标准系列及样品，根据条件参数设置对实验进行测定。9、测定完毕后关气、清洗管道、关机。七、注意事项1、在开启仪器前，一定要注意开启载气。2、一定注意各泵管无泄漏，定期向泵管和压块间滴加硅油。3、实验时注意在气液分离器中不要有积液，以防溶液进入原子化器。4、在测试结束后，一定在空白溶液杯和还原剂容器内加入蒸馏水，运行仪器清洗管道，关闭载气，并打开压块，放松泵管。5、从自动进

8、样器上取下样品盘，清洗样品管及样品盘，防止样品盘被腐蚀。6、硒的检测属于痕量分析，要求整个实验空白要低，实验中要严格控制污染。7、湿法消化样品时，切勿烧干。消化时小心操作，防止被浓酸灼伤。八、思考题1、湿法消化样品的优缺点有哪些?2、加入铁氰化钾的作用是什么？