植物生理学实验-2甲烯蓝吸附法测定根系活力.doc

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1、甲烯蓝吸附法测定根系活力植物根系主要有下列作用：1.对地上部分起支持和固定作用；2.物质的贮藏；3.对水分和无机盐类的吸收；4.合成氨基酸、激素等物质。因此根系活力是植物生长的重要生理指标之一，其测定方法主要有α-萘胺氧化法、甲烯蓝吸附法和TTC法，本实验采用第二种方法进行。[实验目的]：熟悉用甲烯蓝吸附法测定根系活力的方法。[实验原理]：根据沙比宁等的理论，植物对溶质的吸收具有吸附的特征，并假定这时在根系表面均匀地吸附了一层被吸附物质的单分子层，然后在根系表面产生吸附饱和，继之，根系的活跃部分能将原来吸附着的物质解吸到细胞中去，继续产生吸附作用。常用甲烯蓝作为吸附物质，它的被吸附量可以根据

2、吸附前后的甲烯蓝浓度的改变算出，甲烯蓝浓度可用比色法测定。已知1mg甲烯蓝成单分子层时占有的面积为1.1m2。据此可算出根系的总吸收面积，从解吸后继续吸附的甲烯蓝的量，即可算出根系的活跃吸收表面积，可作为根系活力的指标。[器材与试剂]：分光光度计，移液管，烧杯，比色管；0.0002mol/L(0.064g/L)甲烯蓝。[实验材料]：植物根系[实验步骤]：1.将0.0002mol/L的甲烯蓝溶液(每毫升中含0.064mg甲烯蓝)分别倒入3个小烧杯中，编好号码，每个烧杯中溶液体约10倍于根系体积(排水法：将根系洗净控干后，放在装有一定体积水的量筒里)。准确记下每个烧杯中的溶液量。2．将冲洗干净的

3、待测根系，用吸水纸小心吸干(慎勿伤根)，然后依次浸入盛有甲烯蓝溶液的烧杯中，在每杯中浸1.5min，注意每次取出时都要使甲烯蓝溶液能从根上流回到原杯中去。3．从3个小烧杯中各吸取甲烯蓝溶液1mL，用去离子水10倍后，660nm处比色测OD，在标准曲线上求得各杯中所剩甲烯蓝毫克数，再根据杯中原有的甲烯蓝毫克数，求出每杯中为根系所吸收的甲烯蓝毫克数。4．甲烯蓝标准曲线的制作：将甲烯蓝溶液1、2、3、4、5、6μ/mL的系列溶液，于660nm处比色测OD，以甲烯蓝溶液浓度为横坐标，OD值作为纵坐标，绘制标准曲线。5．依照下列公式求出根的吸收面积：总吸收面积(m2)=(第一杯中被吸收的甲烯蓝毫克数+

4、第二杯中被吸收的甲烯蓝毫克数)×1.1m2活跃吸收面积(m2)=第三杯中被吸收的甲烯蓝毫克数×1.1m2将实验结果添入下表(自己做)：植物名称杯中甲烯蓝溶液体积mL初始甲烯蓝浓度mg·mL-1浸根后溶液浓度mg·mL-1烧杯123被吸附的甲烯蓝量mg烧杯123根吸收总面积m2根活跃吸收面积m2活跃吸收面积%根体积cm3总比表面积（m2·cm-3）活跃比表面积（m2·cm-3）