实验五 根系活力的测定.doc

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1、实验五根系活力的测定一、意义根系具有吸收养分、水分、支持植株和合成有机物的能力。它是作物赖以生存的基础。根系的生长和地上部的生长是密切相关的和互为依存的,根系生长好才能保证地上部各器官也相应地繁茂茁壮。因此,研究根系的活力对于搞清作物的根部营养,提高作物根系吸收养分、水分能力等具有重要的实际意义。在科学研究中常把根系的呼吸强度、阳离子代换量(CEC)、对有色物质的吸附量和ATP酶的活性等作为作物根系活力的指标。二、测定原理及方法(一)根系表面积的测定1.甲烯兰吸附法(1)原理:根据植物根系吸收矿质养分的理论,根系对溶质的最初吸收具有吸附的特性。假定吸收时

2、在根系表面均匀地覆盖了一层被吸附物质的单分子层,因此能根据根系对某物质的吸附量来测定根的吸收面积。常用甲烯兰(C16H18H3SCl)作为被吸附物质,已知1mg甲烯兰胶单分子层时占用l.1平方米的面积。故可由它被吸附前后溶液的浓度变化用比色法准确地测定根系总吸收面积。当根系在甲烯兰溶液中已达饱和并仍留在溶液中时,根系的活跃部分能把已吸附在根表的甲烯兰吸收到细胞中去,并继续吸附甲烯兰。因此,又可以从后一吸附量中求出根系的活跃吸收面积。(2)方法:①取出完整根系(注意保留根尖和细根),小心地清洗掉根表吸持的砂粒和土粒,洗诤后用吸水纸除去根表水分。②将根放入有

3、刻度的容器中〈试管或置筒〉,缓缓加水至某一刻度,取出根系待水从根上流入容器中,准确用滴定管加水至刻度处,加入水量即为根系的总体积,并记载。③根据根系的总体积,吸取0.0002N的甲烯兰溶液(每升溶液中含甲烯兰64mg),吸取量约为根系总体积的十倍,分别放入三个有1、2、3编号的小烧杯中,准确记下每杯所取溶液的毫升数。④取量好体积的根系,用吸水纸小心吸去根表水分,切忌损伤根系,依次浸入盛有甲烯兰溶液的小烧杯中,在每杯中浸泡的时间为l.5分钟。注意每次取出时都要使甲烯兰溶液从根表流回到原烧杯中。⑤从三个烧杯中各取1ml溶液放入刻度试管中,再稀释至l0倍,用光

4、电比色计在660nm波长处测定其光密度,并根据标准曲线,求出每杯浸过根系后溶液中剩下的甲烯兰毫克数。(3)结果计算:①总吸收面积(m2)=[(Cl-C11)×V1+(C2-C2l)×Ⅴ2]×1.1②活跃吸收面积(m2)=[(C3-C31)×V3×1.1③活跃吸收面积(%)=活跃吸收面积(cm3)/根的体积{cm3}(注):Cl、C2、C3——1、2、3号烧杯中加入甲烯兰溶液的浓度〈mg/ml〉Cl1、C21、C31——1、2、3号烧杯中浸根后甲烯兰溶液的浓度〈mg/ml〉Vl、V2、V3——1、2、3号烧杯中加入甲烯兰溶液的量{mL)。(4)仪器试剂及标

5、准溶液的配制:①刻度试管或量筒。②50ml小烧杯:3个③光电比色计:一台④0.0002N甲烯兰溶液:精确称取0.0640g甲烯兰,放入烧杯中加水溶解,并转入1000ml容量瓶中,加水定容。⑤甲烯兰标准溶液:吸取0.0002N的甲烯兰溶液15.6ml,放入100ml容量瓶中,加水至刻度摇匀。此液每毫升含甲烯兰0.010mg,取刻度试管7支,编号,依次吸取该溶液0,1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0ml,分别加水至l0ml,依次相当于每毫升含甲烯兰0,0.000l,0.002,0.004,0.006,0.0008,0.010mg,依同法比色。2

6、.硝酸钙重量法:(1)原理:当干燥的植物根系浸入一种溶液中,然后捞出淋干表面的溶液,那么就会有一部分溶液被吸附在根系表面,溶液的重量就会减少。硝酸钙是经过研究后筛选出的最为理想的物质,因为它是中等分子〈分子量64.1〉且极易溶解于水。当硝酸钙和水以6:1的比例配制成溶液时,很易吸附在根系表面,这样可以通过重量差减法求出被根系吸附的量,以此表示根系的表面积。(2)方法步骤:①将植物根系冲洗干净,然后风干备用。②将6份的Ca(NO3)2加入1份R 的水中,轻微的加热使其溶解,配制成Ca(NO3)2:H2O为6:1的溶液备用。③根据根系的大小在烧杯中取一定量的

7、上述溶液,要充分保证根系全部浸入,放在天平或台秤上,记录其重量(G0)。④将风干的根系浸入溶液l0秒钟,然后取出根系在烧杯上方停留30秒钟,使表面的多余溶液淋进烧杯,记录其重量(G1),两次重量差ΔG=G0-Gl就表示被根系吸附的量,即根系表面积的大小。(3)仪器和试剂①天平或台秤:一架。②镊子:一把⑶烧杯④玻棒⑤Ca(NO3)2溶液〈二〉根系活力的测定l.α-萘胺法(1)原理:根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度有着密切关系,根据研究认为根表对α-萘胺的氧化作用是在过氧化物酶的催化下进行的,使部分根表染成红色,其反应如下:故可根据α一萘胺溶液与根系接触一定

8、时间后,测定溶液中未被氧化的α-萘胺含量,确定根的活力。溶液中未被氧化的α-萘胺

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