核酸提取效率验证方案.doc

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1、核酸提取效率验证方案1、选用试剂盒内带的阳性质控品作为参考品（因其是合成的质粒，纯度比较高）；2、准备10只干净的1.5ml离心管，分别加100ul阴性血清，每管分别5ul阳性质控品混匀作为待测样本；3、在上述的10管待测样本中分别加100ul浓缩液，充分混匀后，12000rpm离心10min，弃上清，留沉淀；4、10管待测样本沉淀中分别加入20ulDNA提取液充分混匀，100℃恒温10±1min；5、12000rpm离心5min，备用；6、取24管PCR反应管,第一组10管直接分别加阳性质控品5ul，第二组10管分别加提取好的核酸5ul，另外加一组（4管

2、）标准品。7、各反应管瞬时离心，上机；8、温度条件设置按说明书。9、提取效率分析：第一组10管定量值分别计算对数值并计算出算术平均值（）第二组10管定量值分别计算对数值并计算出算术平均值（）DNA提取效率=注：RNA提取效率验证同DNA,一组直接加阳性质控品，一组参与提取和逆转录过程。