GelRed-核酸电泳用染料.doc

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1、GelRed核酸染料（10,000×水溶液）GelRed核酸染料特点●无毒性：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远远小于EB。●灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBRGreenI。●稳定性高：适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。●信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。●操作简单：与EB一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪观

2、察。●适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于dsDNA或ssDNA或RNA染色。●无需改变滤光片及观察装置：标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在300nm紫外光附近可得到最佳激发。GelRed使用方法简介1．胶染法（用法同EB）（推荐方法）（1）制胶时加入GelRed核酸染料。每50mL胶中加入5μLGelRed核酸染料。（2）按照常规方法进行电泳即可。u注：此方法染色染料用量相对较少。500μL染料大约可以做100块50

3、mL的胶。当染料稀释在TBE或者类似的电泳缓冲溶液中时可以使用微波炉加热，从而与通常制备预制凝胶的方法相同。含有染料的预制凝胶可以成批制备，并可以长期保存直到使用。2．泡染法（1）按照常规方法进行电泳。（2）用0.1M的NaCl水溶液按照3300﹕1的比例稀释GelRed浓缩液，混匀，制成3×GelRed染色溶液。（例如：在45mL水溶液中加入5mL1M的NaCl溶液及15μL10,000×GelRed水溶液。）（3）将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色30分钟左右，染色时间因凝胶浓度和厚度而定

4、。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上，让稀释液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。u注：用泡染法染色时，染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用3次左右。几种核酸染料比较名称灵敏度稳定性适用性安全性价格GelRed高高通用大小片段电泳染色美国安全认定无毒中GelGreenI高高通用大小片段电泳染色美国安全认定无毒中SYBRGreenI极高稍差100bp以上片段电泳染色花菁染料，低毒高SYBRGreenII极高稍差单链核酸分子电泳染色花菁染料，低

5、毒高GoldViewI低高500bp以上片段电泳染色认定不清低EB低高100bp以上片段电泳染色强致癌，强诱变低特别提醒：如果您使用的是紫外成像仪，请选择GelRed；如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测，请选择GelGreen。