不同抗生素对紫雨桦离体叶片愈伤组织诱导的影响.pdf

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1、第34卷第3期西南林业大学学报Vol，34No32014年6月JOURNALOFSOUTHWESTFORESTRYUNIVERSITYJun．2014doi：10．3969／j．issn．2095—1914．2014．03．005不同抗生素对紫雨桦离体叶片愈伤组织诱导的影响王芳姜静(林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)，黑龙江哈尔滨150040)摘要：以紫雨桦无菌叶片为试材，研究头孢霉素、头孢曲松钠、羧苄青霉素和特美汀4种不同浓度的抑菌抗生素对紫雨桦离体叶片愈伤组织诱导的影响，分析4种抑茵抗生素对农杆菌EHA105(

2、pCHS)的抑菌效果。结果表明，抗生素是头孢霉素、头孢曲松钠、特美汀比羧苄青霉素抑菌效果好，其中头孢霉素和头孢曲松钠的适宜浓度范围为200～400mg／L、特美汀为400～800mg／L。30～40mg／L的卡那霉素、l5～20mg／L的G418或潮霉素还可用于紫雨桦为受体的遗传转化中筛选转化体。关键词：紫雨桦；抗生素；离体；叶片；愈伤组织；诱导中图分类号：$723．1文献标志码：A文章编号：2095—1914(2014)03—0027—05EffectsofDiferentAntibioticsonInductionof

3、CallusfromtheLeavesofBetulapendula‘PurpleRain’WANGFang，JIANGJing(StateKeyLaboratoryOiTreeGeneticsandBreeding(NortheastForestryUniversity)，HarbinHeilongjiang150040，China)Abstract：Theeffectsoffourkindsofantibacterialantibiotics，(Cefotaxime，Ceflriaxone，Carbenicillina

4、ndTimentin)oninductionofcalluswerestudiedusingtheleavesofBetulapendula‘PurpleRain’asexplants，andtheeffectsoftheantibacterialantibioticsoninhibitingAgrobacteriumEHA105(pCHS)werealsoanalyzed．TheresultsindicatedthatthebestantibacterialantibioticswereCephalosporins，Ce

5、flriaxoneandTimentininAgrobacterium-mediatedtransformation．TheappropriateconcentrationofCefotaximeorCeftriaxonewas200—400m#L，andTimentinwas400—800mg／L．Theresultsalsoshowedthat30—40mg／Lkanamycin，15—20mg／LG418orHygromycinweretheidealpressuretoscreentransformantforBe

6、tulapendula‘PurpleRain’．Keywords：Betulapendula‘PurpleRain’；antibiotics；invitro；leaf；callus；induction转基因是获得植物新品种的方法之一，人们常植物受体细胞的分化，从而影响植株的再生。研采用农杆菌介导法来获得成功的林木转化子¨，究表明，遗传转化中所用的农杆菌主要有迄今为止，育种学家已利用该方法获得了抗逆、早EHA4404、EHA105和AGL1等’，不同种类的花等性状的转基因株系。。然而在植物转基因的农杆菌对抗生素的敏感程度有差

7、异，植物表达载体筛选过程中，抑菌抗生素和选择抗生素种类及浓度携带的外源基因不同也可能影响抑菌抗生素的使的确定是转基因成功的关键，因为抑菌抗生素在抑用剂量和种类'm。因此，在利用农杆菌介导法制农杆菌的同时也对植物细胞产生伤害作用，抑制开展植物转基因之前，必须对供试植物受体进行抗收稿日期：2013—11—25基金项目：国家高技术研究发展计划项目(2013AA102704)资助。第1作者：王芳(1988一)，女，硕士生。研究方向：林木遗传育种。Email：842139075@qq．con。通信作者：姜静(1960一)，女，教授。

8、研究方向：林木遗传育种。Email：jiangjing1960@126．con。28西南林业大学学报第34卷生素敏感试验，筛选抑菌效果好同时又对供试植物1．2试验方法再生影响小的抗生素作为抑菌剂，并确定其最佳使活化农杆菌EHA105(pCHS)的菌种至对数用浓度，才能保证其既能抑制农杆菌的生长，又能期，