黑莓叶片、叶柄愈伤组织诱导

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1、黑莓叶片、叶柄愈伤组织诱导王鲁北基金项目：国家自然科学基金项目（31000753）；江苏省农业科技自主创新基金项目（CX[10]109）；江苏省科技基础设施建设计划项目（BM2009041；BM2010458）资助。作者简介：王鲁北（1985-），女，山东临沂，硕士研究生，主要从事黑莓生物技术研究。电话：025-84347063，E-mail:xwlubei@126.com通讯作者：李维林，lwlcnbg@mail.cnbg.net。，张春红，王小敏，胡淑英，李维林*，吴文龙（江苏省中国科学院植物研究所，江苏南京210014）摘要：

2、以黑莓品种‘Arapaho’无菌苗的叶片、叶柄为外植体，研究了外源生长调节剂和培养条件对黑莓愈伤组织诱导的影响。结果表明，在MS培养基中单独附加生长素类激素NAA或者2,4-D，以及细胞分裂素6-BA或者TDZ，都可以使黑莓‘Arapaho的’叶片、叶柄产生愈伤组织，但是不同的激素及其浓度，出愈时间、愈伤组织诱导率以及愈伤组织的大小和形态等各不相同；基本培养基类型和光照时间长短对黑莓叶片、叶柄愈伤诱导没有明显影响。关键词：黑莓；叶片；叶柄；愈伤组织；组织培养InductionofCallusfromLeafandPetioleofB

3、lackberryWANGLu-bei1,ZHANGChun-hong,WUWen-long,LIWei-lin*（InstituteofBotany,JiangsuProvinceandChineseAcademyofSciences,Nanjing210014,China）Abstract：Experimentwascarriedoutusingleavesandpetiolesofblackberry‘Arapaho’asexplantsforevaluatingtheeffectofplantgrowthregulators

4、,darktreatmentandbasicmediaoncallusinduction.TheresultsshowedthatleafandpetioleofblackberrycouldgeneratecallusonMSmediasupplementedwithNAA,2,4-D,TDZor6-BA,anddifferenceofinducingperiod,inductionrate,sizeandshapeofcallusexistedinhormonetypeandconcentration.Darktreatment

5、andbasicmediadidn’tmarkedlyinfluencethegenerationofcallusfromleafandpetioleofblackberry.Keywords：Blackberry;leaf;petiole;callus;tissueculture黑莓（Rubusspp.）是多年生浆果类果树[1]，果实为聚合果，营养丰富，富含糖、果酸及多种维生素，有防衰老和提高人体免疫力等功效，尤其是过氧化物歧化酶（SOD）含量为水果之最[1]，是近年来国内外兴起的第三代水果之一[2]，具有很高的经济价值。黑莓适应

6、性强，耐旱耐瘠，结果早，见效快，具有广阔的开发前景，是开发利用中国中南部低山丘陵的极好经济树种之一[3]。黑莓原产北美，中国于上世纪80年代开始引种利用研究[4]，目前在南方很多区域进行了大面积的推广和种植[5-8]。近年来，我国在黑莓的引种、选育、栽培、繁殖、食用及药用价值产品的研发和利用诸多方面进行了大量研究，发展速度较快[9]。Arapaho由阿肯色州大学1992年推出，杂交品种，谱系：(Ark-550×Cherokee)×Ark-883[10]。该品种于2004年在美国国家基因组资源中心（NCGR），美国农业部农业研究局（U

7、SDAARS）的HummerKim博士帮助下引入南京。该品种直立，无刺，生长势较好。组织培养作为一种技术手段，可以应用于植物的快繁与脱毒、种质保存、次生物质生产、细胞工程和基因工程等生物技术育种领域。关于黑莓和树莓的组织培养研究，70年代国外已有报道，包括愈伤诱导[11-12]、茎尖及腋芽分化[13-14]。愈伤组织是指形态上没有分化但能进行活跃分裂的一团细胞，离体培养条件下产生的愈伤细胞具有再分化的潜能[15]。愈伤组织培养具有多种用途，一方面可用于研究植物生长发育及分化的机制、遗传变异规律，另一方面可用于细胞培养筛选工业、农业、

8、医药生产上有用的无性系，或用于原生质体培养中的原生质体来源等[16]。茎尖、茎段、顶芽、种子、胚、子叶、胚轴、真叶等都可以作为外植体产生愈伤组织[15]。叶片、叶柄材料的来源广泛，取材方便又不损坏植株，受时间季节限制较少还可大量取材，