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时间:2020-06-03
《葡萄糖调节蛋白78在卵巢癌细胞衰老过程中的作用.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第43卷第4期第391页华中科技大学学报(医学版)Vo1.43No.4P.3912014年8月ActaMedUnivSciTechnolHuazhongAug.2014葡萄糖调节蛋白78在卵巢癌细胞衰老过程中的作用*李伟,李双,李莉,贾瑶,杨洁,栗妍,汪辉,马丁△华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,武汉430030摘要:目的拟了解葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在卵巢癌细胞衰老过程中所发挥的作用,并初步进行相关机制探讨。方法亚凋亡剂量顺铂诱导卵巢癌A2780细胞衰老,并继续培养至出现衰老逃脱现象;
2、衰老相关的D一半乳糖苷酶检测细胞衰老情况;流式细胞仪分析细胞周期情况;Westernblot检测GRP78及相关蛋白表达情况。siRNA反义抑制GRP78的表达,观察衰老逃脱细胞克隆形成情况。结果亚凋亡剂量顺铂作用A2780细胞后发生明显Gz/M期阻滞,细胞衰老染色阳性。继续培养3周后出现衰老逃脱细胞克隆的形成,并可被顺铂再次诱导进入衰老状态。GRP78蛋白在衰老的A2780细胞及再次被顺铂诱导进入衰老状态的衰老逃脱细胞中均呈低表达,而在衰老逃脱细胞中重新恢复其高表达。反义抑制A2780细胞中GRP78
3、蛋白表达后P53及CyclinB1蛋白表达均明显升高,Cdc2蛋白表达明显下降,同时伴有细胞衰老逃脱能力的明显降低。结论GRP78在顺铂诱导卵巢癌细胞衰老过程中起到抵抗衰老的作用,其可作为一个提高卵巢癌化疗疗效的新靶点进行进一步的研究关键词:葡萄糖调节蛋白78;卵巢癌;衰老逃脱细胞;P53中图分类号:R737.31DOI:10.3870/j.issn.1672—0741.2014.04.005RoleofGRP78ProteinintheSenescenceof0varianCancerCellsLiW
4、ei,LiShuang,LiLietalDepartmentofGynecologyandObstetrics,TongJiHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030,ChinaAbstract0bjectiveChemotherapeuticdrugsofsub—apoptosisdosecaninducethesenescence—likechangeoftumorcellsan
5、dthesenescence—escapedphenomenon.ThisstudywasdesignedtoinvestigatetheroleofGRP78proteininthesenescenceofovariancancerceilsandtherelatedmechanism.MethodsCisplatinofsub—apoptosisdosewasusedtoinducethesenescenceofA278Ocells,whichwerethenculturedtobecomesene
6、scence-escapedcells.Senescence-associatede—galactosidasewasusedtode—tecteellsenescence.Cellcyclewasdetectedbyflowcytometry.TheexpressionlevelsofGRP78anditsrelatedproteinsweremeasuredbyWesternblot.Theformationofsenescence—escapedcellclonewasobservedaftert
7、heGRP78expressionwasknockeddownbysiRNA.ResultsAftertreatmentwithcisplatinofsub—apoptosisdose,A2780cellswereobviouslyarrestedatG2/Mphaseandpositiveforsenescence-associated8-galactosidase.Senescence~escapedcel1cloneswereformedafterculturefor3weeksandtheyco
8、uldbeinducedintosenescenceagainbycisplatin.TheGRP78proteinwaslowlyexpressedinsenescentA2780cellsandsenescence-escapedcellsthatwerere—inducedintosenescencebycispaltin.butretrievedtoahighlevelofex—pressioninsenescence-escape
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