温度ph对酶活力的影响

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1、二．教案与讲稿一、教案课程名称生物化学实验授课专业和班级2005级临床本科及麻醉本科授课内容温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性的影响授课学时4学时授课地点分析实验室日期2006.10.13节次6、7、8、9节教学目的掌握温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理；唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；熟悉各种仪器的使用和操作。教学重点温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理，怎样设计合理的实验方案来验证温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响。教学难点让学生理解温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理教具黑板、粉笔、实验材料、实验仪器等。教学方法小班讲

2、课教学过程再次强调实验室规则要求，对上次的实验进行评价和总结10分钟简述实验过程，并对实验所用的实验仪器作介绍5分钟阐述温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理，并对实验的结果进行预测。35分钟设计合理的实验方案并进行操作（学生）100分钟实验结果观察与讨论10分钟参考书籍（1）张文峰，黄林邦主编《分析与检测实验技术》（江西高校出版社）（2）周爱儒主编《生物化学》（第六版，人民卫生出版社）思考题或/及作业（1）影响本次实验的因素？（2）怎样才能克服影响实验结果的因素？课后总结二、讲稿[实验目的]1:掌握温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性影响的基本原理2:熟

3、悉各种仪器的使用和基本操作[实验原理]唾液淀汾酶所催化的反应为：淀汾——>糊精（不彻底产物）——>麦芽糖（彻底产物）。碘液显色反应：碘液本身为棕色，与淀粉反应显深蓝色，与分子量大小不同的糊精呈蓝、紫、红等色，与麦芽糖不呈色。1.温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性的影响情况温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、失活；2.pH：酶活性最大时的环境pH为最适pH。pH不仅会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶变性、失活。3.激活

4、剂与抑制剂：激活剂能增加酶的活性，而抑制剂则会抑制酶的活性，Cl-为唾液淀粉酶的促进剂，而Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。[操作步骤]1．收集唾液（自来水漱口、收集唾液5ml于小烧杯、蒸馏水稀释10倍、小漏斗棉花团过滤、置37度水浴箱中保温，备用。）2．取试管10支，分三组按下表操作：A．温度组A1管A2管A3管唾液（2ml）冰水浴10分钟37度水浴10分钟100度沸水浴10分钟1%淀粉（含NaCl）20d20d20d冰水浴15分钟37℃水浴15分钟100℃水浴15分钟碘液2d2d2d显色深棕色浅棕色蓝色B．PH值组B1管B2管B3管磷酸盐缓冲液（2ml）PH值5.0

5、PH值6.8PH值8.01%淀粉（含NaCl）2ml2ml2ml唾液10d10d10d摇匀，立即置37度水浴箱中保温，每隔1分钟从2号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻，分别向3管中加入0.3%碘液2滴，观察颜色变化。显色浅蓝色浅棕色浅蓝色C．激活剂、抑制剂组C1管C2管C3管C4管1%淀粉（不含NaCl）20d20d20d20d溶液（2d）1%NaCl1%CuSO41%Na2SO4蒸馏水唾液10d10d10d10d摇匀，立即置37度水浴箱中保温，每隔2分钟从1号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻，分别向4管中

6、加入0.3%碘液2滴，观察颜色变化。显色浅棕深蓝紫、红或浅蓝紫、红或浅蓝结果与分析：（学生）讨论：（学生）