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1、二.教案与讲稿一、教案课程名称生物化学实验授课专业和班级2005级临床本科及麻醉本科授课内容温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性的影响授课学时4学时授课地点分析实验室日期2006.10.13节次6、7、8、9节教学目的掌握温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理;唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程;熟悉各种仪器的使用和操作。教学重点温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理,怎样设计合理的实验方案来验证温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响。教学难点让学生理解温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理教具黑板、粉笔、实验材料、实验仪器等。教学方法小班讲
2、课教学过程再次强调实验室规则要求,对上次的实验进行评价和总结10分钟简述实验过程,并对实验所用的实验仪器作介绍5分钟阐述温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理,并对实验的结果进行预测。35分钟设计合理的实验方案并进行操作(学生)100分钟实验结果观察与讨论10分钟参考书籍(1)张文峰,黄林邦主编《分析与检测实验技术》(江西高校出版社)(2)周爱儒主编《生物化学》(第六版,人民卫生出版社)思考题或/及作业(1)影响本次实验的因素?(2)怎样才能克服影响实验结果的因素?课后总结二、讲稿[实验目的]1:掌握温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性影响的基本原理2:熟
3、悉各种仪器的使用和基本操作[实验原理]唾液淀汾酶所催化的反应为:淀汾——>糊精(不彻底产物)——>麦芽糖(彻底产物)。碘液显色反应:碘液本身为棕色,与淀粉反应显深蓝色,与分子量大小不同的糊精呈蓝、紫、红等色,与麦芽糖不呈色。1.温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性的影响情况温度:对酶的活性的影响为双效性,当酶促反应的温度为最适温度时,最有利于酶促反应的进行。温度过低,酶的活性减弱,温度太高,会使酶变性、失活;2.pH:酶活性最大时的环境pH为最适pH。pH不仅会影响酶的活性,还会影响底物的解离状态,从而影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶变性、失活。3.激活
4、剂与抑制剂:激活剂能增加酶的活性,而抑制剂则会抑制酶的活性,Cl-为唾液淀粉酶的促进剂,而Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。[操作步骤]1.收集唾液(自来水漱口、收集唾液5ml于小烧杯、蒸馏水稀释10倍、小漏斗棉花团过滤、置37度水浴箱中保温,备用。)2.取试管10支,分三组按下表操作:A.温度组A1管A2管A3管唾液(2ml)冰水浴10分钟37度水浴10分钟100度沸水浴10分钟1%淀粉(含NaCl)20d20d20d冰水浴15分钟37℃水浴15分钟100℃水浴15分钟碘液2d2d2d显色深棕色浅棕色蓝色B.PH值组B1管B2管B3管磷酸盐缓冲液(2ml)PH值5.0
5、PH值6.8PH值8.01%淀粉(含NaCl)2ml2ml2ml唾液10d10d10d摇匀,立即置37度水浴箱中保温,每隔1分钟从2号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻,分别向3管中加入0.3%碘液2滴,观察颜色变化。显色浅蓝色浅棕色浅蓝色C.激活剂、抑制剂组C1管C2管C3管C4管1%淀粉(不含NaCl)20d20d20d20d溶液(2d)1%NaCl1%CuSO41%Na2SO4蒸馏水唾液10d10d10d10d摇匀,立即置37度水浴箱中保温,每隔2分钟从1号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻,分别向4管中
6、加入0.3%碘液2滴,观察颜色变化。显色浅棕深蓝紫、红或浅蓝紫、红或浅蓝结果与分析:(学生)讨论:(学生)
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