电刺激促骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化.pdf

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1、第30卷第3期生物医学工程学杂志VoI．3ONo．32013年6月JournalofBiomedicalEngineeringJune20l3电刺激促骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化*严中琴杨刚崔燎。何学令况薇吴文超刘小菁李良△1(四川大学华西基础医学与法医学院，生物医学工程研究室，成都610041)2(四川大学电气信息学院医学信息工程学，成都610065)3(广东医学院药理学教研室，湛江524023)4(四川大学华西医院再生医学研究中心心血管疾病研究室，成都610041)摘要：观察体外电刺激对大鼠

2、骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向心肌样细胞分化的影响。选用第3、4代rBMSCs用于实验。实验分为3组：(1)电刺激组，rBMSCs分别暴露于1、2、4、6V电压，频率2Hz，脉宽5ms的电刺激，2h／d，连续刺激10d；(2)5-氮胞苷(5-Aza)组，给予10ttmol／L5-Aza诱导24h，然后采用完全培养液培养10d；(3)对照组，采用完全培养液培养10d。通过倒置相差显微镜逐日连续观察细胞的生长状况和形态特征；采用实时荧光定量PCR方法检测GATA4，a一肌动蛋白(a—actin)，辅

3、肌动蛋白(ACTN2)，心肌肌钙蛋白T(TNNT2)的mRNA表达；采用免疫荧光染色技术检测TNNT2的蛋白表达。结果显示：电刺激组、5-Aza组的GATA4、a—actin、ACTN2和TNNT2mRNA表达与TNNT2蛋白表达明显高于对照组(P

4、1—5515．20l301O4EffectsofElectricalStimulationontheDifferentiationofMesenchymalStemCellsintoCardiomyocyte。likeCellsYanZhongqinYangGang2CuiLiao3HeXuelingKuangWeiWuWenchao4LiuXiaojing4LiLiang’1(InstituteofBiomedicalEngineering，WestChinaCollegeofPreclinica

5、lMedicineandForensicMedicine，SichuanUniversity，Chengdu610041，China)2(InstituteofMedicalInformaticsEngineering，CollegeofElectricalEngineering&Information。SichuanUniversity，Chengdu610065，China)3(Departmentofpharmacology，GuangdongMedicalCollege，Zhanjiang5

6、24023。China)4(LaboratoryofCardiovascularDiseases，WestChinaHospital，SichuanUniversity，Chengdu610041，China)Abstract：Theaimofthisstudyistoinvestigatetheeffectsofelectricalstimulation(ES)ontheinductionofratbonemarrowmesenchymalstemcells(rBMSCs)todifferenti

7、ateintocardiomyocyte—likecellsinvitro．ThethirdorfourthgenerationoftherBMSCswasrandomlydividedintothreegroups，i．e．ESgroup，5-Azacytidine(5-Aza)group，andcontrolgroup．ThoseintheESgroupwithcompletemediumwereexposedto1，2，4and6V，2Hz，5msESfor2heveryday，lasting

8、for10d．Thoseinthe5-Azagroupwereinducedby10p．mol／L5-Azafor24h，thenthemediumwaschangedtocompletemediumwithout5-Aza．Thoseinthecontro1groupwereonlyculturedwithcompletemedium．ThegrowthstatusandmorphologicalfeaturesofrBMSCswereobservedbyinver