胡桃醌通过降低AKT活性抑制肺癌A549细胞增殖.pdf

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1、2013年8月基础医学与临床August2013第33卷第8期Basic&ClinicalMedicineV01．33No．8文章编号：1001—6325(2013)08—1032—06研究~g-文胡桃醌通过降低AKT活性抑制肺癌A549细胞增殖刘元银，雷淑慧，杨燕，蒋幼凡(1．重庆医科大学附属第二医院呼吸内科，重庆400010；2．铜梁县人民医院重症监护科，重庆402560；3．攀枝花市中心医院呼吸内科，四川攀枝花617067)摘要：目的探讨肽酰脯氨酰顺反异构酶(PIN1)抑制剂胡桃醌(Juglone)对肺癌A549细胞增殖的影响及分子机制。方法

2、用胡桃醌(0、6．25、12．5、25和50moL／L)处理A549细胞，MrI-I'法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡及周期，rea1．timePCR检测PIN1、AKTmRNA表达，Westernblot检测PIN1、AKT及AKT．pS473蛋白表达。结果胡桃醌能浓度依赖性抑制A549细胞增殖，促进细胞凋亡，将细胞周期阻滞在G：／M期和S期。与对照组相比，各处理组P舢mRNA水平随着胡桃醌浓度增加而降低(P<0．05)。不同浓度胡桃醌处理组PIN1蛋白表达为1．032±0．056、0．892±0．024、0．596±0．023和0．396

3、±0．021，均显著低于对照组的1．280±0．046(P<0．05)；AKT—pS473蛋白表达为0．554±0．023、0．464±0．018、0．362±0．015和0．228±0．020，均显著低于对照组的0．626±0．015(P<0．05)；48h处理组PIN1及AKT-pS473蛋白表达分别为0．575±0．036和0．338±0．014，显著低于24h的0．764±0．032和0．436±0．023(P<0．05)。结论PIN1抑制剂胡桃醌可以抑制肺癌A549细胞的增殖，其机制可能是通过降低AKT．pS473活性来实现的。关键词：肽

4、酰脯氨酰顺反异构酶；胡桃醌；细胞增殖；肺癌中图分类号：R734．2文献标志码：ATheinhibitioneffectofJugloneonproliferationoflungcancerA549cellsthroughdown-regulationofAKTactivityLIUYuan—yin，LEIShu—hui，YANGYan，JIANGYou—fan(1．Dept．ofRespiratoryMedicine，theSecondAfiliatedHospital，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing40

5、0010；2．IntensiveCareUnit，thePeople’sHospitalofTongliangCounty，Chongqing402560；3．Dept．ofRespiratoryMedicine，theCentralHospitalofPanzhihuaCity，Panzhihua617067，China)Abstract：ObjectiveToexploretheeffectandmechanismofPIN1inhibitorJugloneoncellproliferationofhumanlungcancercellsA54

6、9invitro．MethodsA549cellsweretreatedbydifferentconcentrationsofJuglone．Cellpro—liferationwasmeasuredbyMTrassayrespectively．TheapoptosisrateandcellcycleofA549cellsweredetectedbyflowcytometry．Real-timePCRwascarriedtodetectthemRNAexpressionofPINlandAKT．Westernblotwereusedtoobserv

7、etheproteinexpressionofPIN1andAKT—pS473incells．ResultsWiththeincreasingofJuglone’Sconcentration，theinhibitionefectonproliferationandtheapoptosisrateofA549cellsenhancedinadose—depen—dedmanner，andA549cellscyclewereblockedinG2／MandSperiod．Real—timePCRresultshowedthemRNAlevelofPIN

8、lA549cellstreatedbyJuglonesignificantlydecreasedcomparedwithc