氟化物对家蚕血液和中肠中海藻糖含量的影响.pdf

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1、第36卷第2期西南大学学报(自然科学版)2O14年2月VoI．36No．2JournalofSouthwestUniversity(NaturalScienceEdition)Feb．2014文章编号：1673—9868(2Ol4)20014—07氟化物对家蚕血液和中肠中海藻糖含量的影响‘米智，武婧洁，李姣蓉，赵诏，SENDEGEYAP，蔡刚宁，朱勇西南大学生物技术学院，重庆400715摘要：为了探讨氟化物对家蚕代谢机制的影响，以家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种734为研究材料，从5龄起蚕开始分别添食经5O，100，200，400mg／kgNaF溶液浸泡后的新鲜桑叶，检测家蚕血液和中肠中海藻

2、糖含量的变化．结果表明．血液中，随着添氟浓度的增加，734添氟组海藻糖含量约是对照组的0．89，0．95，0．65和0．6】倍。T6约是对照组的0．82，0．86，0．87和0．89倍．734的3个低浓度添氟组和2个高浓度添氟组之间的差异极显著(<0．01)，而T6各处理组之间的差异均不显著；在中肠中，随着添氟浓度的增加，734添氟组海藻糖含量约是对照组的0．，1．o4。1．18和1．3O倍，T6组约是对照组的0．66，0．76，0．68和0．67倍．734对照组和最高浓度添氟组之间的差异显著(p

3、之间的差异极显著(户0O．01)．氟化物能使耐氟家蚕血液和中肠，以及敏感家蚕血液中的海藻糖含量降低，却能使敏感家蚕中肠组织中海藻糖含量升高．推测家蚕中海藻糖含量与蚕体的耐氟性能有一定的相关性．关键词：家蚕；氟化物；海藻糖；血液；中肠中图分类号：Q591文献标志码：A近年米随着工农业的发展，陶瓷、砖瓦、磷肥、炼铝、水泥、玻璃、火力发电等部f1排放的废气{J含有人量氟化物，给蚕桑生产带来较大的危害．氟化物是一类原生质毒剂，研究表明，氟化物随桑叶进入查体累积于消化液、肠壁和体壁等处，通过消化管进入血液，在血液和组织中与蛋白质结合，抑制生长发育，出现氟中毒症状．氟中毒能损害中枢神经系统，内分泌系统及

4、心、肝、肾等，并引起生物酶学改变和免疫功能改变．海藻糖，也称为蕈糖，是一种贮藏性糖类，被称为昆虫体内的血糖口，化学名称：a—I)一吡哺(型)葡糖基r)一吡喃葡糖苷，是由2个葡萄糖分子通过半缩醛羟基结合而成的一种非还原性双糖，J、‘泛存f低等植物、藻类、细菌、真菌、酵母、昆虫及其它无脊椎动物中，是应激代谢的重要产物，具有供给能量和提供生物大分子合成底物等功能．海藻糖是昆虫血淋巴中的主要糖类和能量物质，它的浓度高低在调节昆虫的生长和发育等方面起着非常重要的作用．研究表明毒性物质诱发会引起昆虫体内的许多生理变化和机体的功能紊乱．此，住外界压力条什促使下，昆虫会改变自身的新陈代谢以满足机体对能量的要

5、求．本试验通过研究家蚕添食NaF后血液和1收稿¨期2ol{Jo1lo接会项f_j庆市大攻关项tt(CSTC，2009AAi024)．作栉简介米智(1985一)，男，山西大同人，博士研究牛，t要从事家蚕遗传育种的研究工作通信作者术勇，教授，博{生导师．第2期米智，等：氟化物对家蚕血液和中肠中海藻糖含量的影响15中肠海藻糖含量的变化，为从生理生化水平上阐明家蚕对氟化物的代谢机制提供参考．1材料与方法1．1试验材料家蚕耐氟品种T6、敏感品种734，由中国农业科学院蚕业研究所提供，西南大学生物技术学院家蚕遗传育种室保存．按照常规方法饲养到5龄起蚕时，对照组喂食清水浸泡11min后自然晾干的新鲜桑叶，

6、试验组分别用50，100，200，400mg／kgNaF溶液浸泡11min后自然晾干的桑叶饲养，每隔8h添食1次，每天添食3次．试验采用平行设计，每组设3个重复．从5龄起蚕第1～7d每天分别取各组幼虫的组织样品．1．2标准曲线的绘制1I2．1标准溶液制备精确称取干燥至恒重的海藻糖0．1g，于100mL容量瓶中，以蒸馏水定容至刻度，摇匀，得到l_0mg／mL的海藻糖母液，再移取其中10mL到100mI容量瓶中，以蒸馏水稀释到刻度线，摇匀配成标准海藻糖溶液，浓度为0．1mg／mL．1．2．20．2蒽酮一硫酸试剂配制称取0．2g蒽酮，加入100mI浓硫酸，摇匀，置于棕色瓶(现配现用)．1．3组织样

7、品制备1．3．1中肠组织的分离[¨在冰浴中，用消毒解剖刀将幼虫从腹部到头部剖开，取出整个肠道，去除肠道内由围食膜包裹的食物，将中肠部分放到预冷的生理盐水中透析，去除其中过量的蔗糖，将透析后的中肠于滤纸上迅速吸干，每5头蚕的中肠收集于一个离心管中．参照钟国华和Dong"的方法适当修改后进行，将供试幼虫组织于预冷的玻璃匀浆器中，加人3mL0．5mol／L三氯乙酸于冰浴上匀浆，在4℃下4000r／min离心10mi