S100A6siRNA对卵巢癌细胞生物学行为的影响.pdf

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1、48ChineseJournalofWomanandChildHealthResearch，2014，Vo1．25No．1S100A6siRNA对卵巢癌细胞生物学行为的影响郑福利，张颖一，赵亚宁，党淼，王建(1．第四军医大学西京医院妇产科，陕西西安710032；2．解放军第三二三医FE+-~产科，陕西西安710054；3．陕西中医学院第二附属医院妇产科，陕西成阳712000)[摘要]目的探讨S100A6蛋白表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法以卵巢癌细胞A2780为研究对象，利用RNA干扰技术特异性降低S100A

2、6表达水平后，分别用实时定量PCR和Westernblot检测S100A6siRNA对S100A6表达水平的抑制效率。用流式细胞术检测S100A6siRNA转染前后A2780细胞的细胞周期变化，用Transwell试验观察S100A6siRNA转染前后侵袭能力的变化，用MTT法检测S100A6siRNA对A2780细胞顺铂敏感性的影响。结果S100A6siRNA转染组细胞中S100A6mRNA和蛋白表达水平与S100A6siRNA呈浓度、时间依赖性明显下调，抑制效率可达63．75％～80．68％。在与空白对照组和阴

3、性对照siRNA组相比，S100A6siRNA出现了G0／G1期比例升高，s期比例降低，差异有统计学意义(X=6．2l1，P=0．045)。Transwell试验表明，6．25、12．5nmoI／LS100A6siRNA分别转染48h后，A2780细胞穿膜细胞数目分别为78±7．51和27±8．24，与阴性对照组(91±5．78)相比，穿膜细胞显著减少，差异有统计学意义(=3．898，P=0．048)。MTT法测定SIO0A6siRNA转染后A2780细胞对顺铂敏感性的影响结果显示，S100A6siRNA引起页铂对

4、A2780细胞的抑制率增加(=9．609，P=0．022)，而空白对照组和阴性对照siRNA组之间无明显差异。对顺铂半数致死剂量(IC50)的计算结果显示，分别转染6．25、l2．5nmol／LS100A6siRNA的A2780细胞对)'1~eftIC50值分别为13．42Ixmo]／L和l1．321xmol／L，与空白对照组和阴性对照siRNA组相比均显著降低，差异有统计学意义(X2=5．566，P=0．018)。结论S100A6siRNA转染卵巢癌A2780细胞后，引起A2780细胞GO／G1期阻滞，侵袭能力降

5、低，同时对顺铂的敏感性有所增强，可能是卵巢癌靶向治疗的候选基因。[关键词]卵巢癌；钙结合蛋白$100A6；小干扰RNA；侵袭转移；顺铂doi：10．3969／j．issn．1673—5293．2014．01．017[中图分类号]11737．31[文献标识码]A[文章编号]1673—5293(2014)01—0048—04InfluenceofS100A6siRNAonbiologicalfeaturesofhumanovariancancercellZHENGFu—li，ZHANGYing一，ZHAOYa—ning

6、，DANGMiao，WANGJian(1．DepartmentofGynecologyandObstetrics，X~ingHospital，FourthMilitaryMedicalUniversity，ShaanxiXi’an710032，China；2．DepartmentofGynecologyandObstetrics，PLA323Hospital，ShaanxiXi’an710054，China；3．DepartmentofGynecologyandObstetrics，SecondAffiliated

7、Hospital，ShaanxiCollegeofTradiaonalChineseMedicine，ShaanxiXianyang712000，China)1AbstractIobjectiveToinvestigatetheinfluenceofS100A6proteinonbiologicalfeaturesofhumanovariancancercel11ineA2780．MethodsHumanovariancancerA2780celllinewastransfectedwithsmallintefer

8、ingRNA(siRNA)toreducetheexpressionofS100A6specifically，andrealtimePCR(RT—PCR)andWesternblotwereusedtodetectthesuppressionefficaeyofS100A6siRNAonS100A6expression．Thecellcyclewaseval