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《自体CIK细胞治疗中晚期消化道恶性肿瘤临床疗效评估.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、自体CIK细胞治疗中晚期消化道恶性肿瘤临床疗效评估［摘要］目的评估自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）回输治疗中晚期消化道恶性肿瘤效果。方法选择2012年6月〜2013年1月合肥凤凰肿瘤医院生物免疫治疗中心治疗的中晚期消化道恶性肿瘤患者118例，采用自体单个核细胞制备CIK细胞，培养2〜3周后给予静脉输注治疗。通过荧光活化细胞分选法（FACS）测定患者治疗前后的免疫状态、生存质量（Karnofsky评分）、疾病控制率（DCR）,观察毒副作用。结果经培养后，CIK细胞扩增较好，达到预期质量标准。患者治疗后CD4+、CD8+细胞比率较治疗前增加,差异有统计学意义（P20分者27例，10〜1X1010
2、。1.3CIK细胞制备及质量控制包括：①单采机（CS3000,美国）采患者自体外周血单个核细胞；②淋巴细胞分离液分离单个核细胞；③加入无血清培养基GT-T551培养液（宝日医公司，日本），调节细胞浓度；④加入已包被CD3单克隆抗体（100ng/mL）的细胞瓶内，再加入肿瘤坏死因子-Y（INF-Y）,培养24h；⑤加入白介素-la（IL-la）,补加白介素-2（IL-2）；⑥每2〜3天传代扩增培养1次，同时补充IL-2和INF-Y。视具体活化、扩增情况，CIK细胞一般在培养2〜3周后进行回输，回输前3d采用微生物快速检测系统做微生物检测，包括细菌、真菌、支原体、病毒、内毒素等，确保培养体系中无致
3、病因子污染及生长。其次确定培养物的质和量是否达标。1.4CIK细胞回输视细胞生长状态，2〜3周后做微生物检测（细菌、真菌、LPS,支原体等）；流式细胞仪（FCM,美国）检测细胞膜标志。CD3+/CD56+细胞应占大多数；同位素释放试验检测杀伤活性；收集细胞、染色、镜检、计数（每次收集细胞数32X109,活率395%）；尼龙膜过滤。细胞回输前先静脉滴注0.9%NaCl50mL,然后连接细胞悬液滴瓶回输细胞，每次回输细胞中加IL-230万U,10%人体白蛋白。采用输血器回输，约lh细胞回输完毕，再行滴注0.9%NaCl50mL。患者接受治疗1〜4个疗程。1.5疗效评定标准1.5.1CD3+、CD4
4、+、CD8+、CD4/CD8+,CD3+/CD56+治疗前后变化情况参照本实验室方法，主要应用单抗技术和流式细胞仪测定患者治疗前后血液中CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8+比值及CD3+/CD56+膜标志动态变化情况。具体测定时间为细胞回输前1周及回输治疗后2周。1.5.2生活质量标准采用Karnofsky评分标准，提高＞20分为显效；提高10〜20分为有效；提高10分为进展。1.5.3肿瘤抑制观察临床症状是否改善，肿瘤体积在治疗后1个月内有无变化、长期带瘤生存情况参考实体瘤疗效评估新标准（RECIST标准）。①目标病灶评价：完全缓解（CR）：所有目标病灶消失；部分缓解（PR）：基线
5、病灶长径总和缩小N30%；进展（PD）：基线病灶长径总和增加》20%或出现新病灶；稳定（SD）：基线病灶长径总和有缩小但未达PR或有增加但未达PD。②非目标病灶的评价：CR：所有非目标病灶消失和肿瘤标志物水平正常；SD：1个或多个非目标病灶和/或肿瘤标志物高于正常持续存在；PD：出现1个或多个新病灶或/和存在非目标病灶进展。本研究肿瘤病灶拟采用疾病控制率（DCR）表示，即DCR=CR+PR+SD。1.6统计学方法采用统计软件SPSS13.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数土标准差（x±s）表示，两独立样本的计量资料采用u检验；计数资料以率表示，采用x2检验。以P20分者27例，10〜综上
6、所述，不断改进，不断创新，不断进步，不断揉入新的治疗元素将会强化CIK细胞治疗效果，赋予其更旺盛的生命力。[参考文献][1]Schmidt-wolfIG,NegrinRS,KiemHP,etal.UseofaSCIDmouse/humanlymphomamodeltoevaluatecytokine-inducedkillercellswithpotentantitumorcellactivity[J].ExpMed,1991,174（1）：139-149.[2]FinkeS,TrojaneckB,LefterovaP,etal.Increaseofproliferationrateanden
7、hancementofantitumorcytotoxicityofexpandedhumanCD3+CD56+immunologiceffectorcellsbyreceptor-mediatedtransfectionwiththeinterleukin-7[J].GeneTher,1998,5(1)：31-39.[3]Schmidt-WolfIG,LefterovaP,JohnstonV.P
