Waters高效液相色谱仪标准操纵规程.doc

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1、Waters高效液相色谱仪标准操纵规程,1.目的描述Waters高效液相色谱仪标准操纵规程。2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操纵规程,QC主管负责监视本规程的实施。4.定义HPLCHighPerformanceLiquidChromatography,高效液相色谱仪。5.安全留意事项5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。5.2留意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。6.规程6.1.WatersHPLC的组成:贮液器®输液泵®自动进样器®分离柱（柱温箱）®紫外检测器®控制及数据处理系统（MiIlennium32化学工作站）

2、。6.2.HPLC系统的打开及封闭顺序6.2.1打开顺序•对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后打开Millennium32化学工作站。泵与色谱工作站的连接:对于510泵，由于此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在Remote状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按Menu键，待显示屏切换至Mode状态下，其状态是Loca,按Edit/Enter键，在LocaI的L前有闪动的光标显示，按。键，Local转换成Rem,再按Edit/Enter键，此命令已输进进往,最后按Stop/Run键，使泵

3、处于Run状态这时泵和工作站的连接即告成功。泵的任何动作都可由工作站来控制。还应留意这一步工作在每次开机时都要进行。对于Alliance2690系统：先打开AlIiance2690主机、检测器电源开关，待初始化完毕后，再进进Millennium32化学工作站。对于活动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；活动相在使用前一定要经0.45mm的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表）过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的活动相未经过滤直接使用。应

4、养成良好操纵习惯：规范操纵，树立保护HPLC整套系统的概念，尤其对于输液泵、色谱柱、检测器，在使用后应及时冲洗，以免污染而使其寿命缩短或损坏，尤其如操纵者使用了含盐的活动相，更应留意清洗的步骤：首先用脱过气的纯水在流速为1ml/min左右冲洗30〜60分钟，再用含50%以上甲醇或乙腊的水溶液以相同的流速冲洗20〜30分钟左右。如要卸下柱子，在经过上述冲洗过程之后，再经纯甲醇或乙腊以1ml/min的流速冲洗20~30分钟，柱子卸下后应马上拧紧柱堵。流速的变化应采用门路式递增或递减的方式，启动泵时，应在2分钟之内由小流速慢慢增大到所需的流速，泵封闭

5、时亦然（流速递减）。切忌流速的骤变，6.2.2封闭顺序首先退出MiIIennium32化学工作站，再封闭系统的其他部分。6.3.MiIIennium32化学工作站Millennium32色谱治理系统是集数据采集、处理、HPLC系统的控制、结果的治理、报告的打印为一体的综合系统。下面就着重先容该系统的基本操纵知识。6.3.1MiIIennium32化学工作站的进进打开化学工作站，系统自动进进ProgramManager界面，双击MiIlennium肖像，这时进进MiIlennium界面，双击SessionManager图标，系统将自动初始化，以使

6、工作站和HPLC整套系统进行联接。初始化后，按系统要求键进你的UserName和Password,这时你已进进该系统。6.3.2Project的进进和建立•Project的进进：在SessionManager窗口下，击Project肖像(或从View中选择Projects),在其中有已建好的Project,双击你所需的Project肖像，再进行你想做的工作。•Project的建立从File中选择New,即显示NewProject的画面。在ProjectName中输进你的Project名称。在InitialIzeProject项目中选择Copy中

7、的fiIterandfieIds或Methods。在FromProject中选择要拷贝的现存Projecto选择TabIespacesize3选OK,存贮并退出。当MiIlennium软件在建立一个新的Project时，在屏幕上及时显示出完成建立新Project的百分比。当达到100%时，在SessionManager画面即出现一个新的Project肖像。6.3.3收集数据的一般过程使用Millennuium32收集数据的一般过程如下：在Project窗口内建立收集数据所需仪器的仪器方法；建立包括此仪器方法的方法组；使用此方法组收集数据，本部分

8、包括：建立仪器方法，建立方法组，收集样品。-建立/修改仪器方法从SessoinManager窗口，打开所需的Project。选择Method按钮，现存