Waters高效液相色谱仪标准操作规程.doc

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1、5.1目的5.2描述Waters高效液相色谱仪标准操作规程。5.3适用范围5.4化验室5.5责任者5.6化验员应严格遵照该操作规程,QC主管负责监督本规程的实施。5.7定义5.8HPLCHighPerformanceLiquidChromatography,高效液相色谱仪。5.9安全注意事项5.10有机溶媒有害健康,各溶剂瓶口应封严。5.11注意检查废液桶中废液应避光,防止废液桶满外溢。5.12规程5.13WatersHPLC的组成:贮液器®输液泵®自动进样器®分离柱(柱温箱)®紫外检测器®控制及数据处理系统(Breeze化学工作站)。5.14

2、HPLC系统的打开及关闭顺序5.1打开顺序5.2对于分体式:请按总电源、放射性物质检测器、检测器、泵、进样器、柱温箱、的顺序打开开关,待各部分分别显示初始化完毕后,最后打开Breeze化学工作站。5.3泵与色谱工作站的连接:对于510泵,因为此泵与色谱工作站是单向联系,如要使泵在Remote状态下由工作站控制,首先要在泵的键盘上按Menu键,待显示屏切换至Mode状态下,其状态是Loca,按Edit/Enter键,在Local的L前有闪动的光标显示,按Ù键,Local转换成Rem,再按Edit/Enter键,此命令已输入进去,最后按Stop/R

3、un键,使泵处于Run状态这时泵和工作站的连接即告成功。泵的任何动作都可由工作站来控制。还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。5.4对于Alliance2690系统:先打开Alliance2690主机、检测器电源开关,待初始化完毕后,再进入Millennium32化学工作站。5.5对于流动相的要求:对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂;对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂;对于水,应采用经纯水机处理过的超纯水;流动相在使用前一定要经0.45mm的滤膜(滤膜分为水相膜与有机相膜,确保使用正确的滤膜,参见附表)过滤、超声真空脱气方可使用,严禁含盐的流

4、动相未经过滤直接使用。5.6应养成良好操作习惯:5.1规范操作,树立保护HPLC整套系统的概念,尤其对于输液泵、色谱柱、检测器,在使用后应及时冲洗,以免污染而使其寿命缩短或损坏,尤其如操作者使用了含盐的流动相,更应注意清洗的步骤:首先用脱过气的纯水在流速为1ml/min左右冲洗30~60分钟,再用含50%以上甲醇或乙腈的水溶液以相同的流速冲洗20~30分钟左右。5.2如要卸下柱子,在经过上述冲洗过程之后,再经纯甲醇或乙腈以1ml/min的流速冲洗20~30分钟,柱子卸下后应马上拧紧柱堵。5.3流速的变化应采用阶梯式递增或递减的方式,启动泵时,应

5、在2分钟之内由小流速慢慢增大到所需的流速,泵关闭时亦然(流速递减)。切忌流速的骤变。5.4关闭顺序5.5首先退出Millennium32化学工作站,再关闭系统的其他部分。5.6Millennium32化学工作站5.7Millennium32色谱管理系统是集数据采集、处理、HPLC系统的控制、结果的管理、报告的打印为一体的综合系统。下面就着重介绍该系统的基本操作知识。5.8Millennium32化学工作站的进入5.9打开化学工作站,系统自动进入ProgramManager界面,双击Millennium肖像,这时进入Millennium界面,双击

6、SessionManager图标,系统将自动初始化,以使工作站和HPLC整套系统进行联接。初始化后,按系统要求键入你的UserName和Password,这时你已进入该系统。5.1Project的进入和建立5.2Project的进入:在SessionManager窗口下,击Project肖像(或从View中选择Projects),在其中有已建好的Project,双击你所需的Project肖像,再进行你想做的工作。5.3Project的建立5.4从File中选择New,即显示NewProject的画面。5.5在ProjectName中输入你的Pr

7、oject名称。5.6在InitiallzeProject项目中选择Copy中的filterandfields或Methods。5.7在FromProject中选择要拷贝的现存Project。5.8选择Tablespacesize。5.9选OK,存贮并退出。5.10当Millennium软件在建立一个新的Project时,在屏幕上及时显示出完成建立新Project的百分比。当达到100%时,在SessionManager画面即出现一个新的Project肖像。5.11收集数据的一般过程5.12使用Millennuium32收集数据的一般过程如下:

8、在Project窗口内建立收集数据所需仪器的仪器方法;建立包括此仪器方法的方法组;使用此方法组收集数据。5.1本部分包括:建立仪器方法,建立方法组,收

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