非小细胞肺癌中PAX6表达及其对肿瘤细胞增殖与侵袭作用机制研究.pdf

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1、中国癌症杂志2014年第24卷第8期CHINA0NCOLOGY2O14Vo1．24No．8非小细胞肺癌~PAX6表达及其对肿瘤细胞增殖与侵袭作用机制研究熊安洲陈菁曹艳胡小萍武汉市第一医院呼吸科，湖北武汉430022[摘要]背景与目的：转录因子PAX6主要表达于胚胎期，不同肿瘤中PAX6呈现高表达，通过不同的信号通路发挥肿瘤抑制或促进作用。检~IJPAX6在非小细胞肺癌(non—smal1cel1lungcancer，NSCLC)中的表达，通过RNAi下调其表达，研究PAX6对肿瘤细胞侵袭和增殖力以及cyclinE、p38表达水平的影响。方法：应用蛋白印记检测86

2、例NSCLCn~瘤组织及癌旁配对组织以及2例细胞系中PAX6的表达情况。应用PAX6特异性siRNA序列，转染NSCLC细胞系A549，MTT法、Transwelld,室、划痕实验检测转染前后细胞增殖、侵袭和迁移能力的对比。蛋白质印记法(Westernblot)检测转染前后cyclinE及p38表达情况。结果：对比癌旁组织及正常人支气管上皮细胞16HBE，PAX6在NSCLC组织及A549细胞系中显著高表达。选取高效siRNA序列转染细胞系后，PAX6表达的下调抑制了肿瘤细胞的增殖及集落形成，G期细胞比例增加，细胞侵袭及迁移力均下降。基因敲低细胞cyclinE及

3、p38活性受到抑制，表达下调。结论：PAX6通过调控MAPK通路及eye1inE的表达加速肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移，是潜在的NSCLC诊疗靶点。[关键词]非小细胞肺癌；PAX6；SiRNA；p38；CyclinEDOI：10．3969~．issn．1007—3969．2014．08．008中图分类号：R734．2文献标志码：A文章编号：1007．3639(2014)08．0604．06ExpressionandinteractionmechanismofPAX6inhumannon-smallcelllungcancerXIONGAn—zhou，CHENJin

4、g，CAOYan，HUXiao-ping(DepartmentofRespiratory,FirstHospitalofWuhan，WuhanHubei430022，China)Correspondenceto：CHENJingE-mail：1803876732@qq．com[Abstract]Backgroundandpurpose：ThetranscriptionfactorPAX6isprimarilyexpressedinembryos．PAX6isalsoexpressedinseveraltumorsandplaysoncogenicortunlor

5、suppressorrole．ThisstudyaimedtoinvestigatetheexpressionofPAX6innon-smallcelllungcancerfNSCLC)tumorsamplesandcelllines；andevaluatetheefectsofPAX6ontheproliferationandinvasionoftumorcellsandtheexpressionlevelofcyclinEandp38．Methods：WesternblotwascariedouttodetectthePAX6proteinlevelin86

6、NSCLCtumortissues，pairedadjacentnormaltissuesand2celllines．PAX6siRNAwastransfectedintohumanlungcancerA549cellline．Anchorage—independentgrowthandinvasivenessoftumorceilsweremeasuredbyMTTandtranswellcellinvasionassay,respectively．CyclinEandp38proteinlevelbeforeandaftertransfectionwered

7、etectedbywesternblot．Results：Comparisonwithtumoradjacenttissuesandnormalhumanbronchialepithelialcells16HBE，PAX6inNSCLCtissuesandA549celllineswassignificantlyhigherexpression．AftertransfectionwitheficientsequenceofPAX6siRNAforA549celllines，thedownexpressionofPAX6inhibitstumorcellproli

8、feration，the