非诺贝特保护非酒精性脂肪性肝病小鼠胰岛素抵抗作用机制的探讨.pdf

《非诺贝特保护非酒精性脂肪性肝病小鼠胰岛素抵抗作用机制的探讨.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014Jun；49(6)·721·非诺贝特保护非酒精性脂肪性肝病小鼠胰岛素抵抗作用机制的探讨沈馨茹，鲁云霞，章秋摘要目的研究非诺贝特改善非酒精性脂肪性肝病床病理综合征。近年来，随着人们生活水平的提高(NAFLD)小鼠的胰岛素抵抗是否与内质网应激(ERS)有和生活方式的改变，NAFLD的发病率逐年上升，已关。方法采用高热量高胆固醇饮食(HCD)建立NAFLD成为最常见的慢性肝脏疾病⋯。NAFLD除了可直小鼠模型，非诺贝特40mg／(kg·d)灌胃治疗2周，葡萄糖接导致失

2、代偿期肝硬化、肝细胞癌和移植肝复发外，耐量试验(G1Tr)和胰岛素耐量试验(IrI’)分析胰岛素抵抗还可影响其他慢性肝病的进展，并参与2型糖尿病的改善作用，检测血清血脂和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天和动脉粥样硬化的发病过程_2]。NAFLD的重要病冬氨酸氨基转移酶(AST)指标，HE及油红O染色观察肝脏组织的病理学变化，Real—timePCR和Westernblot法检测过理学特征之一是胰岛素抵抗_3j，近年来文献4报道氧化物酶体增殖物激活受体0l(PPARc~)、ERS标志物葡萄糖其可能与内质网应激(endoplasmicreticulumst

3、ress，调节蛋白78(GRP78)和转录因子GADD153(CHOP)的表ERS)有关。非诺贝特是目前临床上较为常用的调达。结果与正常饮食(SCD)组相比，HCD组小鼠胰岛素脂药物，其作用机制可能与降脂、抗炎和抗氧化应激抵抗明显，血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋等有关，但尚无其参与ERS的相关报道J。由于非白胆固醇(LDL—C)显著升高(P<0．O1，P<0．05)，高密度脂诺贝特的药效学效应较明确，该研究先用模拟人类蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P<0．01)，肝细胞内有大小高热量高胆固醇饮食(high．calorieand

4、high—choles—不等的脂滴形成，可见气球样变的肝细胞及炎性细胞浸润；teroldiet，HCD)的比例制作的饲料诱导构建PPARc~、GRP78mRNA及蛋白表达显著降低，CHOPmRNANAFLD小鼠模型，然后给予单一剂量的非诺贝特干及蛋白表达显著升高。与HCD组相比，HCD+非诺贝特预，初步探讨其保护作用是否与改变过氧化物酶体(HCF)组小鼠血清TG明显降低(P<0．05)，肝细胞脂滴含量、变性肝细胞及浸润的炎细胞明显减少，PPARo~、GRP78增殖物激活受体o【(peroxisomeproliferator—acivatedmRNA及

5、蛋白表达明显升高，CHOPmRNA及蛋白表达显著receptor仅，PPARa)以及ERS标志蛋白葡萄糖调节降低(P<0．05)。结论非诺贝特有明显的改善NAFLD小蛋白78(glucoseregulatedprotein78，GRP78)和转鼠胰岛素抵抗、降低TG的作用，这可能与激活PPARcL及减录因子GADD153(CCAAT／enhancer—bindingprotein轻ERS有关。homologousprotein，CHOP)的表达有关。关键词非诺贝特；非酒精性脂肪性肝病；胰岛素抵抗；内质网应激；PPARc~1材料与方法中图分类号R332

6、；R965．1；R5751．1实验动物8周龄C57BIM6小鼠36只，清洁文献标志码A文章编号1000—1492(2014)06—0721—05级，雄性，体重20～25g，由安徽医科大学实验动物中心提供，每笼6只，温度20～25℃，相对湿度非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliver35％～60％，自由摄食饮水，常规饲养1周后实验。disease，NAFLD)是指以除外酒精或其他明确的损肝1．2主要试剂非诺贝特(江苏神龙药业有限公因素所致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临司)；油红O(美国Sigma公司)；RNAisoReage

7、nt、Re-al—timePCR试剂盒(大连宝生物工程有限公司)；RT2014—03—20接收试剂盒(美国Fermentas公司)；BCA蛋白定量试剂基金项目：安徽省自然科学基金(编号：1208085MH168、盒(上海生工生物工程有限公司)；3-磷酸甘油醛脱1308085MH154)；安徽医科大学博士启动基金(编号：XJ201o13)氢酶(GAPDH)鼠单克隆抗体(康为世纪生物技术有作者单位：安徽医科大学第一附属医院内分泌科，合肥230022限公司)；兔抗鼠PPARot、CHOP一抗(美国Santa安徽医科大学生物化学教研室，合肥230032Cru

8、z公司)；兔抗鼠GRP78一抗(美国Abc~m公作者简介：沈馨茹，女，硕士研究生；司)；山羊抗兔及山羊抗鼠辣