水稻抗稻瘟病基因Pi-ta和Pi-b多重PCR体系的构建与应用.pdf

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1、作物学报ACTAAGRONOMICAS1NICA2014，4O(9)：1565—1571http：／／zwxb．chinacrops．org／ISSN0496—3490；CODENTSHPA9E-mail：xbzw@chinajourna1．net．caDoI：10．3724／SP．J．1006．2014．01565水稻抗稻瘟病基因Pi-ta和多重PCR体系的构建与应用姚姝刘燕清张亚东朱镇陈涛赵庆勇周丽慧赵春芳于新王才林江苏省农业科学院粮食作物研究所／江苏省优质水稻工程技术研究中心／国家水稻改良中心南京分

2、中心，江苏南京210014摘要：稻瘟病是我国水稻主产区的重要病害之一，其主效抗性基因Pi—ta和Pi．b在我国很多稻区表现广谱持久的稻瘟病抗性，被广泛应用于我国的水稻育种和生产。本研究选用稻瘟病抗性基因Pi—ta和Pi．b及其等位基因的功能标记，在对22份分别已知抗病基因Pi—ta和Pi—b以及感病基因pi．ta与pi—b组成的水稻品种检测验证基础上，建立了2套稻瘟病基因多重PCR体系：体系I同时检测抗病基因Pi—ta与Pi。b，体系II同时检测感病基因pi—ta与pi—b，并利用2套体系对336份高世代

3、育种材料进行检测，与单标记检测结果比较，表现稳定可靠，重复性好。本研究构建的抗稻瘟病基因分子标记多重PCR体系可用于水稻种质资源的快速评价和抗稻瘟病分子标记辅助育种。关键词：稻瘟病；分子标记；抗性基因；多重PCR体系EstablishmentandApplicationofMultiplexPCRSystemforBlastResistanceGenesPi．taandPt．binRiceYAOShu，LIUYan—Qing，ZHANGYa—Dong，ZHUZhen，CHENTao，ZHAOQing—Yo

4、ng，ZHOULi—Hui，ZHAOChun—Fang，YUXin，andWANGCai—LinInstituteofFoodCrops，JiangsuAcademyofAgriculturalSciences／JiangsuHighQualityRiceR&DCenter／NanjingBranchofChinaNationalCenterforRiceImprovement，Nanjing210014，ChinaAbstract：RiceblastiSoneoftheimportantdiseases

5、inmajorriceproducingareasinChina．ThemainblastresistancegenesPf一andPf．bshowedwideanddurableresistancespectruminmanyricegrowingareas．Inthisstudy,twosetsofmultiplePCRsystemprimedbyfunctionalmarkerswereestablishedtoidentifyP—taandPf—b．using22ricevarietieswith

6、knownallelesonbom尸f一andPf—bloci．ThePCRsystemIcoulddetecttheresistanceallelesonPf—taandPf—b1oci．whilethePCRsysternIIcoulddetectthesusceptibleallelessimultaneously．TheefectivenessofthetwoPCRsystemswasvalidatedin336／aponicabreedinglines．Theresultwashighlycon

7、sistentwiththatofmoleculardetectionusingconventionalsinglemarker~Therefore．thetwomultiplePCRsystemsdevelopedarestable，reliableandtime．saving，andcanserveasarapidandeficientmethodtoidentifyPf—taandPi—bgenesinbulkyscreeningandmarker-assistantselectioninricea

8、imingatblastresistancebreeding．Keywords：Riceblast；Molecularmarker；Resistancegene；MultiplexPCRsystem稻瘟病由子囊真菌(Magnaporthegrisea)引起，会丧失抗性[2】。因此，利用分子标记辅助选择(marker-是最严重的水稻病害之一，其危害面积和危害程度assistedselection，MAS)技术将多个具有不同抗谱的