牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制及其机制的探讨.pdf

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1、第36卷第1期右江民族医学院学报Vo1．36NO．12014年2月JournalofYoujiangMedicalUniversityforNationalitiesFeb．2O14牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制及其机制的探讨①孟宇，吕俊，齐世美(皖南医学院生物化学教研室，安徽芜湖241001E—mail：mengyu60@163．com)摘要：目的研究牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用并初步探索其机制。方法MTT法检测牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用，RT—PCR检测BCL一2mRNA、BaxmRNA的表达。结

2、果牛蒡多糖能明显抑制K562细胞的增殖；BCL一2基因表达下调，Bax的基因表达增多。结论牛蒡多糖对K562细胞增殖有抑制作用，其机制可能与BC[一2基因表达下调，Bax的表达上调有关。关键词：牛蒡多糖；K562细胞；BcL一2mRNA；BaxmRNA中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1001doi：10．3969／j．issn．1001—5817．2014．01．004InhibitionofK562cellproliferationbyburdockpOlysaccharideandtherelated

3、mechanismMengYu．LnJun，QiShimei(DepartmentofBiochemistry，WannanMedicalCollege，Wuhu241001，Anhui，ChinaE—mail：mengyu60@163．corn)Abstract：ObjectiveTostudytheinhibitoryeffectofburdockpo1ysaccharideonK562cellproliferationandtostudyitsmechanism．MethodsAnMTTmethodwasusedt

4、odetecttheinhibitionofK562cellprolif—erationbyburdockpolysaccharide，andanRT—PCRmethodwasusedtodetecttheexpressionofBCI一2mRNAandBaxmRNA．ResultsBurdockpolysaccharidecouldsignificantlyinhibittheproliferationofK562cells：theexpressionofBCL一2decreased，andtheexpressiono

5、fBaxgeneincreased．ConclusionBur—dockpolysaccharidecaninhibittheproliferationofK562cells，anditsmechanismmayberelatedtod。wn—regul~tingtheexpressionofBCL一2geneandup—regulatingtheexpressionofBax．Keywords：Burdockpolysaccharide；K562cells；BCL一2mRNA；BaxmRNA多糖作为一种具有特殊生物学活

6、性功能的物质，日益受到南医学院中心实验室)；RNA提取试剂盒(合肥志宏)；逆转录重视，其在抗肿瘤、抗病毒、增加免疫等方面具有一定的功能。一聚合酶联反应(RT—PCR)试剂盒(合肥志宏)。c()z培养箱前期实验已经证实牛蒡多糖对正常小鼠、环磷酰胺致免疫低下(ExcellaEco一170)；酶标仪(EPOCH)；倒置显微镜(O1YM小鼠和s18O肉瘤小鼠的免疫系统均有增强作用，不同剂量组PUS)。的抑瘤率均明显提高，同时能提高荷瘤小鼠巨噬细胞产生NO1．2方法及吞噬活性¨1]，但是牛蒡多糖对K562细胞的抑制作用及机制1．2

7、．1MTT法检测细胞抑制率取对数生长期的K562细未见报道。本课题旨在前期实验研究的基础上，应用MTT、胞，置于24孔板，于37℃、5CO培养箱中培养，每孔加入RT—PCR法检测相关指标，初步探索牛蒡多糖是否对K562100l相应的含药培养基，设置阴性组，在COz培养箱中培养癌细胞体外增殖具有抑制作用，是否影响凋亡相关基因BCI一24h、48h后。每孔加入2O1MTT(5mg／m1)，培养箱继续培2、BaxmRNA的表达，从而探讨牛蒡多糖对K562细胞抑制作养4h，弃去培养基，每孔加入i00lDMSO溶解，摇床10rai

8、n用的可能机制，寻找一种新的能够诱导K562癌细胞凋亡的多轻轻混匀；X-490nrn，测出OD值，计算抑制率：抑制率=(1一糖，作为治疗白血病的天然无毒副作用的药物，为白血病治疗试验组A。。均值／空白对照组A均值)×100。药物的研发提供必要依据。1．2．2RT—PCR测定BCI一2、BaxmRNA的表达取对数1材料