资源描述:
《姬松茸粗多糖对k562细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制探讨》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、姬松茸粗多糖对K562细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制探讨[摘要]目的研究姬松茸粗多糖在K562细胞的增殖、凋亡,以及对转录因子NF-kB的影响,并探究其中的作用机制。方法培养K562细胞,再分别将(2、5、10mg/mL)姬松茸粗多糖加入其中作用48h,之后应用流式细胞术、免疫荧光法等方法观察姬松茸粗多糖在K562细胞的增殖、凋亡和对NF-kB活性中的影响。结果姬松茸粗多糖对K562细胞增殖有很显著的抑制作用,还可以阻止细胞从GO/G1期到G2/M+S期过渡。经过10mg/mL的姬松茸粗多糖诱导48h后,K562细胞
2、CML细胞的凋亡率65.41%,较对照组显著增加,差异有统计学意义(P1.5用EMSA法检测K562细胞的核因子NF-KB的活性核蛋白的提取:各组浓度的姬松茸粗多糖在作用K562细胞48h以后,收获细胞,使用核蛋白抽提试剂盒来提取细胞核蛋白,用BCA试剂盒进行蛋白的定量,保存在_80°C下备用。提取核蛋白提取物2uL,和Y-P32标记的NF-k寡聚核苷酸探针进行结合,并用聚丙烯胺凝胶电泳来分离NF-kB的探针复合物,接着电泳2h,然后在-70°C自显影72h。NF-kB活性检测的结果应用Bio-Rad公司GelDoc凝
3、胶成像系统对膜片进行扫描,同时使用GELpro3.0软件对其滞后带灰度进行分析。1.6统计学处理使用SPSS11.5统计包来进行统计分析,计量资料用()表示,多组间比较用方差分析,P[参考文献][1]HetlandG,JohnsonE,LybergT,etal.EffectsofthemedicinalmushroomAgaricusblazeiMurillonimmunity,infectionandcancer[J].ScandJImmunol,2008,68(4):363-370.[2]YuL,YangS,Sun
4、L,etal.Effectsofselenium-enrichedAgaricusblazeiMurillonlivermetabolicdysfunctioninmice,acomparisonwithselenium-deficientAgaricusblazeiMurillandsodiumselenite[J].BiolTraceElemRes,2014,160(1):79-84.[3]LiX,ZhaoX,WangH,etal.ApolysaccharidefromthefruitingbodiesofAgar
5、icusblazeiMurillinducescaspase-dependentapoptosisinhumanleukemiaHL-60cells[J].TumourBiol,2014,35(9):8963-8968.[4]SokoviM,?iriA,GlamolijaJ,etal.AgaricusblazeihotwaterextractshowsantiquorumsensingactivityinthenosocomialhumanpathogenPseudomonasaeruginosa[J].Molecul
6、es,2014,19(4):4189-4199.[5]ZhangGJ,ChenTB,BednarB,etal.OpticalImagingofTumorCellsinHollowFibers:EvaluationoftheAntitumorActivitiesofAnticancerDrugsandTargetValidation[J].Neoplasia,2007,9(8):652-661.[1]GrumontRJ,GerondakisS.Relinducesinterferonregulatoryfactor4(I
7、RF-4)expressioninlymphocytes:modulationofinterferonregulatedgeneexpressionbyRel/nuclearfactor[kappa]B[J].ExpMed,2000,1919(8):1281-1292.[2]SilvermanN,ManiatisT.NF-kappaBsignalingpathwaysinmammalianandinsectinnateimmunity[J].GenesDev,2001,15(18):2321-2342[3]蔡应木,张俏
8、忻,肖颖秀,等.姬松茸诱导急性淋巴细胞性白血病细胞凋亡的研究[J].广东医学,2008,29(2):204-206.[4]NiWY,WuMF,LiaoNC,etal.ExtractofmedicinalmushroomAgaricuslazeiMurillenhancesthenon-specificandadaptiveimmu