姬松茸粗多糖对k562细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制探讨

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1、姬松茸粗多糖对K562细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制探讨[摘要]目的研究姬松茸粗多糖在K562细胞的增殖、凋亡,以及对转录因子NF-kB的影响,并探究其中的作用机制。方法培养K562细胞,再分别将(2、5、10mg/mL)姬松茸粗多糖加入其中作用48h,之后应用流式细胞术、免疫荧光法等方法观察姬松茸粗多糖在K562细胞的增殖、凋亡和对NF-kB活性中的影响。结果姬松茸粗多糖对K562细胞增殖有很显著的抑制作用,还可以阻止细胞从GO/G1期到G2/M+S期过渡。经过10mg/mL的姬松茸粗多糖诱导48h后,K562细胞

2、CML细胞的凋亡率65.41%,较对照组显著增加,差异有统计学意义(P1.5用EMSA法检测K562细胞的核因子NF-KB的活性核蛋白的提取:各组浓度的姬松茸粗多糖在作用K562细胞48h以后,收获细胞,使用核蛋白抽提试剂盒来提取细胞核蛋白,用BCA试剂盒进行蛋白的定量,保存在_80°C下备用。提取核蛋白提取物2uL,和Y-P32标记的NF-k寡聚核苷酸探针进行结合,并用聚丙烯胺凝胶电泳来分离NF-kB的探针复合物,接着电泳2h,然后在-70°C自显影72h。NF-kB活性检测的结果应用Bio-Rad公司GelDoc凝

3、胶成像系统对膜片进行扫描,同时使用GELpro3.0软件对其滞后带灰度进行分析。1.6统计学处理使用SPSS11.5统计包来进行统计分析,计量资料用()表示,多组间比较用方差分析,P[参考文献][1]HetlandG,JohnsonE,LybergT,etal.EffectsofthemedicinalmushroomAgaricusblazeiMurillonimmunity,infectionandcancer[J].ScandJImmunol,2008,68(4):363-370.[2]YuL,YangS,Sun

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