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《荔枝核提取物对D-半乳糖诱发小鼠学习记忆损伤的保护机制.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、Aug.2013.33(4)实验动物与比较医学LaboratoryAnimalandComparativeMedicine285doi:10.3969/j.issn.1674—5817.2013.04.008荔枝核提取物对一半乳糖诱发小鼠学习记忆损伤的保护机制叶红梅,钟春燕z,黄敏贤1,吕俊华2(1.广州市中医医院药剂科,广州510130;2.暨南大学药学院药理教研室,广州510632)【摘要]目的探讨荔枝核提取物(LitchiSeedAqueousExtracts,LSAE)对D一半乳糖诱发小鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制。方法50
2、只KM小鼠随机分为空白组、模型组、石杉碱甲组(HU,0.4mg‘kgd。)、LSAE低剂量(15g‘kgd-')和高剂量(60g’kgd-)剂量组。上述动物除空白组外,均连续8周皮T(sc)~i射D.半乳糖(500mg·kgd。),并于第5周起分别灌胃相应药物。采用Morris水迷宫测试小鼠学习和记忆能力,用流式细胞仪测小鼠脑组织线粒体膜电位,采用RT—PCR方法测凋亡基因bcl一2mRNA、baxmRNA及B淀粉样前体蛋白(D。APP)mRNA的表达。结果LSAE可明显改善模型小鼠的学习和记忆能力,提高脑细胞线粒体膜电位,增强抗凋亡基
3、因bcl一2mRNA表达,降低促凋亡基因baxmRNA含量,同时下调脑组织B.APPmRNA的表达。结论LSAE具有改善D一半乳糖诱发小鼠学习记忆障碍的作用,其作用机制可能与其提高脑细胞内线粒体膜电位,抑制细胞凋亡和下调淀粉样前体蛋白D—APP的表达有关。[关键词]荔枝核提取物(LSAE);D一半乳糖;学习记忆;线粒体膜电位;凋亡【中图分类号]Q95—33[文献标识码]A[文章编号]1674.5817(2013)04—0285.05荔枝核为无患子科植物荔枝(LitchiChinesis1材料与方法Sonn.)的干燥成熟种子,主要分布于我
4、国广东、广西、福建等地。陈衍斌等归纳了荔枝核含脂肪酸1.1动物与饲养条件和挥发性成分、氨基酸成分及硬脂酸、D一谷甾醇2月龄SPF级KM小鼠5O只,杏早各半,体等其他成分,阐述了荔枝核具有降糖活性、降血质量3O±2g,由广东省医学实验动物中心提供脂活性、抗肿瘤、抗乙肝病毒表面抗原、抑制血[SCXK(粤)2008—0002]。SPF级动物实验室,室温小板聚集等功能⋯,但关于荔枝核改善学习记忆障23~25℃,相对湿度40%一70%,每小时换新风15次碍方面未见报导。通过D.半乳糖建立学习记忆障[SYXK(粤)2011-0021】。自由饮用纯化
5、水,每日换碍模型,探讨了LSAE对学习记忆障碍的改善作水瓶一次。饲料由广东省医学实验动物中心提供。用,本实验将进一步研究荔枝核提取物(LitchiSeed1.2药品及试剂AqueousExtracts,LSAE)对该模型小鼠脑细胞凋亡荔枝核是经广东省农科院果树所荔枝研究室的基因和淀粉样前体蛋白B.APP基因表达的关系。专家鉴定的产白花都市花东镇九一村王木海荔枝园的淮枝核。荔枝核颗粒的制备:取荔枝核洗净,破【收稿日期】2012—11-05核后投料,加水煎煮二次,第一次加药材用8倍【基金项目】广州市中医药中西医结合科研基金资助项目的水,煎煮
6、2h,第二次加药材用7倍的水,煎(N0:2009A016)煮2h,合并滤液,过滤,滤液减压浓缩至相对【作者简介】叶红梅(1970一),女,副主任药师,密度为1.25~1.30(60~65℃)的浸膏,检验合格,取以E-mail:948941503@qq.corn上浸膏,蔗糖粉和药用糊精混匀制备,过l2目筛网【通讯作者】吕俊华(1954一),男,教授,E—mail:yaolilv@163.corn286实验动物与比较医学LaboratoryAnimalandComparativeMedicine制粒,烘干,颗粒检验合格后分装5g/包(生产批
7、小鼠看不到平台及池底。水池温度维持22~24℃,号:1101076,由广东一方制药厂制备)。调整池面摄像头,使其视野覆盖整个水池,为避免D.半乳糖(Sigma公司,批号:119k0103);石杉碱环境对小鼠的判断产生干扰,调整灯光以免水面反甲(南京泽朗医药科技有限公司生产,批号z120101205);射,四周墙壁杜绝挂物,室内务必保持安静。实验线粒体提取试剂盒(生产批号20110628)和JC一1线粒主要分为两部分:一是定位航行实验,即设置平台,体膜电位测试盒(生产批号:20110628)由南京建成生每日灌胃后1h,每只小鼠训练4次,按
8、东、西、物工程研究所提供;BiozolRNA提取试剂盒(Biomiga南、北4个方向入水,小鼠面对池壁投入水中,记R1020一O1);RecombinantDNaseI(TaKaRaD2270A);录小鼠自
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