荔枝核提取物对学习记忆障碍小鼠海马AGEs阳性细胞和Aβ阳性细胞表达的影响.pdf

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1、呻善材JournalofChineseMedicinalMaterials第36卷第4期2013年4月荔枝核提取物时学习记忆障碍小鼠海马AGEs阳性细胞和阳性细胞表达的影响钟春燕’,叶红梅,吕俊华,王晨羽,冯欣,陈晓韵。(1.暨南大学药学院药理教研室,广东广州510632;2.广州市中医医院药剂科,广东广J,i、J510130;3.暨南大学医学院,广东广州510632)摘要目的:探讨荔枝核提取物对D一半乳糖诱致学习记忆障碍小鼠海马AGEs阳性细胞和AI8阳性细胞表达的影响,并观测线粒体结构的变化。方法:5O只昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、石杉碱甲组(0.4mg/k

2、g)及荔枝核提取物高、低(60、15kg)剂量组,除正常对照组外,全部动物连续皮下注射D一半乳糖(500mg/kg)8w,第5周起灌胃相应药物。第8周末测血清糖基化终末产物(AGEs)含量,免疫组化测海马AGEs细胞和卢一淀粉样蛋白(A细胞的表达,透射电镜检查海马细胞线粒体结构。结果:荔枝核提取物能降低模型动物血清AGEs水平,减少海马AGEs阳性细胞和A阳性细胞的表达,并能抑制海马细胞线粒体的肿胀、空泡以及丢失。结论:荔枝核提取物可抑制D一半乳糖诱致小鼠海马组织AGEs阳性细胞和A阳性细胞的表达,并对线粒体具有保护作用,可能与抑制糖基化和氧化应激反应有关。关键词荔枝核提

3、取物;D一半乳糖;学习记忆;糖基化终末产物;一淀粉样蛋白;线粒体中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1001-4454(2013)04-0622-04荔枝核昧甘、性温,归肝、肾经,具有行气散结、电子称量仪器有限公司);紫外分光光度计(美国珀祛寒止痛等功效¨。荔枝核提取物具有调节血糖金埃尔默公司);TGL.16G型高速冷冻离心机(上海和血脂,改善胰岛素抵抗及抗病毒、抗肿瘤、抑制乳安亭科学仪器厂);石蜡切片机(金华市益迪医疗设腺增生和良好的抗氧化应激作用J,目前未见有关备厂,YD一1508RII);透射电镜(JEOLJEM一1400,日荔枝核改善学习记忆障碍方面的

4、研究报道。本室前本)。期工作已经证明荔枝核提取物对D.半乳糖诱致小2方法鼠学习记忆损伤模型具有明显的改善作用及提高机2.1学习记忆障碍小鼠模型建立皮下注射体抗氧化作用,本实验进一步探讨荔枝核提取物D—gal(500mg/kg)连续8W,注射容量为10mL/kg,对该模型小鼠血清糖基化终末产物(AGEs)含量、海并以水迷宫测试学习记忆障碍模型的成立。马AGEs阳性细胞和A阳性细胞表达的影响,并观2.2动物分组及处理小鼠按体质量随机分为5测海马神经元线粒体形态结构的变化。组:正常对照组、模型组、石杉碱甲组(0.4mg/kg)1材料与仪器及荔枝核提取物组(15、60g/kg)。

5、除正常对照组1.1实验动物SPF级2月龄昆明种小鼠50只,外,各组动物均给予D—gal(500mg/kg)造模,并于造雌雄各半,体质量(30±2)g,由广东省医学实验动模第5周开始灌胃给予上述药物,给药容积为10物中心提供,合格证号:粤监证字2004AO19。mL/kg。1.2药物与试剂D一半乳糖(Sigma公司,批号:2.3血清AGEs含量测定小鼠去眼球取血,离119k0103);石杉碱甲(南京泽朗医药科技有限公司心分离血清,按试剂盒说明书测AGEs含量。生产,批号z120101205);荔枝核提取物(广东一方制2.4脑海马AGEs阳性细胞和A阳性细胞的测药有限公司,生

6、产批号1101076);AGEs试剂盒(批定每组取2只小鼠,断头,于冰盘上迅速分离脑组号:20110103)由南京建成生物工程研究所提供;一织,冰冻生理盐水洗净血液后放人4%多聚甲醛固抗A(Invitrogen,787784A)、AGEs(博士德,bs一定,依次脱水、透明,浸蜡、包埋、切片(4txm),二甲1158R):ChemMateDAKOEnvisionDetectionKit苯脱蜡2次,10rain,梯度乙醇水化各1次,5rain,(DAKO,GK500705);二甲苯、乙醇、苏木素染液、戊PBS冲洗5rain,3%过氧化氢室温湿盒孵育10rain,二醛等均为进口

7、分析纯。PBS冲洗3次,5rain,微波炉加热柠檬酸抗原修复1.3主要仪器ES.2000型电子天平(沈阳龙腾液进行修复8rain,PBS冲洗5min,10%正常山羊血收稿日期:2012496—1I作者简介:钟春燕(1986一),女,在读硕士研究生,专业方向:神经与内分泌疾病研究;Tel:15013173396;E-mail:415643154@qq.(1011.通讯作者:吕俊华,Tel:020—85223764;E—mail:yaolilv@163.corn。寸善材JournalofChineseMedicinalMateri

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