黄芪多糖对鲤化学性肝细胞损伤的抑制作用.pdf

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1、第33卷第2期华中农业大学学报Vo1．33No．22014年3月JournalofHuazhongAgriculturalUniversityMar．2014。103～110黄芪多糖对鲤化学性肝细胞损伤的抑制作用贾睿杜金梁。曹丽萍徐跑殷国俊。柏爱旭。1．南京农业大学无锡渔业学院，无锡214081；2．中国水产科学研究院淡水渔业研究中心／农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室／鱼类免疫药理学国际联合实验室，无锡214081；3．淮安出入境检验检疫局，淮安223001摘要为探讨黄芪多糖对鲤肝细胞的保护作用，利用8mmol／L的四氯化碳(CC1)作用肝细胞4h来构建鲤肝细胞体外损伤模型，用不同质量浓

2、度(O．2、0．4和0．8mg／mI)的黄芪多糖分别前处理、后处理和前后处理肝细胞，然后观察肝细胞形态，检测肝细胞活力，细胞上清中谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以及肝细胞中细胞色素P45O酶1A和3A(CyP1A和CYP3A)mRNA的相对表达量。结果显示：黄芪多糖显著地抑制由CC1损伤引起的肝细胞培养上清中GPT、GOT、LDH活性和MDA含量的升高，提高SOD活性及肝细胞的活力(P<0．05或P<0．01)；同时，0．4和0．8mg／mL黄芪多糖显著提高CYP1AmRNA的相对表达量(P％0．05)，0．4m

3、g／mI黄芪多糖显著提高CYP3AmRNA的相对表达量(P

4、氯化碳、物作用机理等[7]。体外研究可减少实验动物所用铬化物、二嗯英、乙醇等化学物质在肝细胞内代谢产数量、节约试验时问、可排除体内其他因素的干生大量的自由基导致肝损伤l2]。目前，在水产动物扰l】，同时可进行多种药物的药理试验Elll。的病害防治及其健康养殖中，中草药提取物以及添黄芪为豆科紫云英膜荚黄芪[Astragalus加剂已被广泛应用，可提高鱼类免疫力，增强病原菌membranceus(Fisch)Bge．]及内蒙黄芪~Astraga—抵抗能力，促进鱼类生长等L3j。研究发现，抗生素、lusmembranceus(Bge．)(A．mongolicusBge．)杀虫剂和抗病毒药物对鱼类肝损

5、伤治疗效果不明HsianJ的根，是一种传统的中草药，用于多种疾病显l_l]，而一些研究者利用天然药物提取物来防治的防治。黄芪的主要药用活性成分黄芪多糖(As—鱼类肝损伤，并取得一定效果[6。]。中草药为天然药tragaluspolysaccharides，APS)具有多方面的活物，具有很多优势，如毒副作用小，不会在鱼体内残性，可增强机体免疫力、改善肝细胞的功能、提高抗留等，已经成为替代抗生素、杀虫剂等治疗、预防水氧化能力[1213]。在水产动物中，Yin等E3,14]研究显产动物疾病的首选药物。因此，中草药在水产动物示，黄芪提取物以及主要成分黄芪多糖能显著提高肝损伤防治中的应用将逐渐扩大。鲤、

6、罗非鱼的免疫力和抗嗜水气单胞菌感染能力。研究表明，体外培养细胞可作为代替模型用于笔者用CC1对体外原代肝细胞进行损伤，通过检测药理和环境毒理学研究l8]。原代肝细胞培养模型被细胞中各种生化指标以及CyP1A和CyP3A基因收稿日期：2013-04—28基金项目：江苏省自然科学基金项目(BK2o12535)、国家自然科学基金项目(31202002、31200918)和中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2013JBFM12)贾睿，博士研究生．研究方向：鱼类药理学与免疫学．E—mail：jiarui5582@163．COrn通信作者：殷国俊，博士，研究员．研究方向：鱼类免疫学．E-mail：y

7、ingj@ffrc．en华中农业大学学报第33卷的相对表达量来探索黄芪多糖对鲤肝细胞的保护作收集上清；黄芪多糖对照组用于验证黄芪多糖对鲤用机制，同时为黄芪提取物在鱼类肝损伤疾病防治肝细胞是否有毒性。中的应用提供一些基础数据。黄芪多糖前处理组(pre—treatment)：用L-15培养基培养4h后，换用含黄芪多糖(0．2、0．4、0．81材料与方法mg／mL)的D15培养基孵育4h，再换用含1．1