脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶1在脂多糖介导肺微血管内皮细胞氧化反应中的调控作用.pdf

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1、·20·痱医学杂志(电版)2014年12月第7卷第6期ChinJCritCareMed(E—lec—tronicE—di—tion·论著·脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶1在脂多糖介导肺微血管内皮细胞氧化反应中的调控作用王林霞汤鲁明龚裕强孙来芳潘国权陈旭【摘要】目的探讨脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)脂多糖介导肺微血管内皮细胞(PMVECs)氧化反应中的调控作川。方法将体外培养人PMVECs分成4组：对照组(未加脂多糖的培养纬{胞)及各剂龟脂多糖组(分别以0．1、1、10g／ml剂量脂多糖刺激培养细胞)。分别多糖刺激6、12、2411检测细胞内活性氧及一氧化氮的水并进行比

2、较。同时利用携带目的基因慢病毒载体转染PMVECs，将其分成对照组，脂多糖组，GFP组及APE1组。对照组为未加脂多糖的培养细胞，脂多糖组为1g／m1剂量脂多糖刺激的培养细胞，GFP组为1txg／ml的脂多糖刺激培养慢病毒空载体转染的细胞，APE1组为lg／ml的脂多糖刺激培养携带APE1基因慢病毒转染的细胞。在12h检测细胞内活性氧、一氧化氮的水平以及细胞APE1的表达情况。结果与对照组比较，各剂量组脂多糖刺激6、12、24h后一氧化氮及活性氧分泌明显上升(P均<0．05)，F1同一剂量组随着时间的推移，‘氧化氮及活性氧分泌的比较，差异均具有统计学意义(尸均<0．05

3、)。转染PMVECsl2h后，脂多糖组APE1的表达明显低于对照组，而APE1组细胞APE1的表达较脂多糖组显著提高(P均<0．05)。与对照组相比，脂多糖组能够诱导PMVECs的一氧化氮及活性氧牛成显著增加，而APE1组能够一定程度抑制一氧化氮及活性氧的产生(P均<0．05)。结论APE1可通过抑制一氧化氮及活性氧的分泌从而减轻脂多糖介导PMVECs的氧化应激反应。【关键词】脂多糖类；一氰化氮；活性氧类；脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶1；肺微血管内皮细胞Modulationofapurinic／apyrimidinicendonucleaseonoxidativestres

4、sreactionofpulmonarymicrovascularendothelialcellsinducedbylip0p0lysaccharidesWangLinxia*,TangLuming,GongYuqiang,SunLaifang,PanGuoquan，ChenXu．DepartmnetoflntensiveCareUnit，theSecondAffiliatedHospitalofWenzhouMedicalCollege，Wenzhou325027,ChinaCorrespondingauthor：GongYuqiang,Email．"gyq12120

5、@163．COrn[Abstract]objectiveToinvestigatethemodulationofapurinic／apyrimidinicendonuclease(APE1)onoxidativestressreactionofpulmonarymicrovascularendothelia1cells(PMVECs)inducedbylip0polysaccharides(LPS)．MethodsPMVECswereculturedinvitroandrandomlydividedinto4groups：controlgroup(Notpolysacc

6、harideofculturedcells)，LPSgroup(polysaeeharideofcuhuredceilswith0．1，1，10g／ml，respectively)．ThelevelsofreactiveoxygenspeciesDOh103877／cma．j．issn．1674—6880．2014．06．005金项口：浙江省医药l1J牛科技计划项目(2013RCA039、2012KYB129)作者位：325000浙汀温州，温州医学院附属第_医院ICU(土林霞、潘权、陈)，重症医学科(汤鲁、龚裕强、孙术芳)通信作者：龚裕强，Email：gyq12120@

7、163．COlll生坐鱼重瘗匡堂苤志(电王版)2014年12月第7雀笫6期ChinJCritCareMed(E1ectronicEdition1DeceIrlher2014，vo1．7No．6·21·(ROS)andNOweremeasuredat6，12，24hafterLPSstimulation．Meanwhile．thePMVECsweretransfectedwithlentivimsesandrandomlydividedinto4groups：controlgroup(Notpolysaccharideofculturedc