顺铂诱导耐药蛋白BCRP与EHD2表达上调并在细胞表面的富集-论文.pdf

《顺铂诱导耐药蛋白BCRP与EHD2表达上调并在细胞表面的富集-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、1284中国肿瘤临床2013年第40卷第21期ChinJClinOncol2013，Vo1．40，No．21www．cjco．cn顺铂诱导耐药蛋白BCRP与EHD2表达上调并在细胞表面的富集：l：李盼①②潘利②付欣①杨少斌①冯婧文①胡明秋②应国光①摘要目的：建立顺铂耐受的人肺腺癌A549／DDP细胞株，研究EHD2(EHdomain—containingprotein一2)与肿瘤细胞药物耐受的潜在关系。方法：以DDP为诱导剂，采用低浓度逐步增量诱导方法建立人肺癌耐药细胞系A549／DDP，采用M1Tr法测定药物敏感性，免疫印迹法检测耐药

2、蛋白BCRP7~EHD2蛋白的表达水平，免疫荧光方法检测BCRP7~EHD2的细胞定位。结果：成功建立DDP耐药细胞系A549／DDP，对DDP的耐药指数为7．6；免疫印迹结果显示BCRP在耐药细胞系A549／DDP中的表达明显高于其亲本细胞A549，EHD2蛋白在耐药细胞系的表达略有增高；免疫荧光成像显示EHD2蛋白在细胞膜表面富集，并与BCRP耐药蛋白共定位。结论：BCRP和EHD2在获得性耐药细胞中富集，并于细胞膜表面共定位，提示内吞蛋白EHD2可能调控耐药蛋白BCRP的膜稳定性，从而介导肿瘤细胞耐药。关键词BCRPEHD2肿瘤耐

3、药doi：10．3969／j．issn．1000—8179．20131427Cisplatin—inducedup-regulationandenrichment0fBCR-PandEHD2oncellsurfacePanLI，LiPAN，XinFU’，ShaobinYANG，JingwenFENG，MingqiuHU，GuoguangYINGCorrespondenceto：GuoguangYING；E-mail：yingguoguang163@163．com。LaboratoryofCancerCellBiology,Tianjin

4、MedicalUniversityCancerInstituteandHospital，NationalCancerClinicalResearchCenter,KeyLaboratoryofCancerPreventionandTreatmentofTianjinCity,Tianjin300060，China．ChinaNationalOffshoreOilGeneralHospital，Tianjin300452，China．ThisworkwassupportedbytheNationalNaturalScienceFounda

5、tionofChinarNos．30772528and81072158)andtheScientificResearchFoundationoftheHealthBureauofTianjinBinhaiNewArea(yos．2011BHKL004and2011BHKY023)．AbstractObjective：Toestablishthecisplatin-resistanthumanlungadenocarcinomacelllineA549／(DDP)cisplatinandtostudytherelationshipbetw

6、eenEHD2anddrugresistance．Methods：DDP-resistanthumanlungcancercelllineA549／DDPwasestablishedbvgradualandstepwisedoseenhancement．MTTwasusedtomeasuredrugsensitivity．WesternblotandimmunofluorescencewereusedtoevaluateexpressionandsubcellularlocalizationofEHD2andbreastcancerre

7、sistanceprotein(BCRP)．Results：TheDDP．resistantcelllineA549／DDPwasestablished，witharesistanceindexof7．6．EHD2andBCRPexpressionsbothincreasedandwereenrichedonthecellsurfacemembrane．Conclusion：BothEHD2andBCRPexpressionswereenrichedontheresistantcellsurfacemembrane，suggesting

8、thatEHD2endocyticproteinstabilizesBCRPandisinvolvedindrugresistance．Keywords：BCRP,EHD2，drugresistance肿瘤