酶联免疫吸附试验在检测丙型肝炎病毒抗体中的敏感性和特异性.pdf

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1、世界最新医学信息文摘2013年3月第13卷第9期225·医学检验·酶联免疫吸附试验在检测丙型肝炎病毒抗体中的敏感性和特异性许恒昌(河南省柘城县妇幼保健院免疫室，河南商丘476200)摘要：目的探讨和分析酶联免疫吸附试验在检测丙型肝炎病毒抗体中的敏感性和特异性。方法使用TECAN半自动酶标仪和其相关的配套洗板机，将我市临床检验中心所提供的质控血清作为此次的参照，并使用上海科华丙型肝炎病毒抗体酶免疫检测试剂盒，对阳性标本则采用胶体金快速吸附法同时进行检测，对同一标本在同一时间和同一温度下采用半自动酶标

2、仪和肉眼进行判读。结果使用酶标仪判读阳性率要明显高于肉眼判读，差异显著，具有统计学意义(P

3、主要病原体，目前呈现为世界性分布Ⅲ。经相研究表明，我国HCV携带者有4000万左右，平均感染率为3．2％[2】。近年来由于受到采血浆感染，导致献血者中发生丙型肝炎人数急剧上升，使得抗一HCV阳性率达到了80．O％『3】。抗一HCV检测试剂主要是采用免疫吸附试验(ELISA)试剂盒，其质量好坏直接关系到病毒的检出情况。为了探讨其灵敏度和特异性，本文就ELISA和胶体金法两种检测抗一HCV的方法检测情况进行3讨论比较和分析，同时探讨酶标仪和洗板操作，以下是详细报道。丙型肝炎是由HCV而导致的一种具有传

4、染性的疾病，1资料与方法对人体的肝脏组织会产生持续性的破坏。对丙型肝炎建立一种具有高度敏感性、特异性、稳定性的检测方法对早期1．1临床资料诊断丙型肝炎患者具有十分重要的意义。此次试验主要是此次的研究样本为我院在2010年2月至2012年8月采用手洗和机洗酶标板，对抗一HCV阳性判断具有非常重期间收治的560例住院患者。对照组为我市临床检验中心要的指导作用。手工洗板受人为操作因素大，但其具有排所提供的质控血清。板干净的优点；机器洗板对实验室污染小，速度快，还能1．2仪器和试剂够进行注液量和静置时间的

5、设定，具有很强的稳定性，但使用上海科华抗一HCV诊断试剂盒(酶免疫试剂盒)；是在板内具有一定的残余试剂，在洗板之后进行手工拍板，英科新创(厦门)科技有限公司所提供的胶体金吸附试剂盒，能够有效地减少误差的发生。所有的操作都按照说明书严格进行。使用TECAN半自动酶此次的试验采用ELISA检测S／CO值>8．0的阳性标本，标仪进行判读。可能是感染HCV的时间比较长，含有病毒量比较高。HCV1．3方法RNA的存在是HCV在人体内的活动的最直接指标，对早在患者空腹的情况下，对其进行静脉血液采集，容量为期H

6、CV感染诊断具有非常重要的价值。当HCVRNV的浓4ml。使用离心机进行离心处理，转速：3000r／min，时间：度比较低时，只能采用核酸的方法进行检测，HCVRNV载10min；将血清分离出。使用ELISA进行抗一HCV检测，检量<8×10copy／ml的血清，其抗一HCV的A值也处于最低临界测结果为阳性的患者，再对患者使用胶体金方法进行复检。值，此时S／CO值会比较低。然而S／CO值在1．0—2．5的标本，1．4统计学方法其可能是处于窗口期，平均大约为70d，含有的病毒量比较数据采用SPSS1

7、7．0软件进行统计和分析，计量资料采低，采用胶体金吸附的方法进行检测和ELISA检查抗一HCV用均数±标准差±)表示。采用z检验，差异显著，具都具有非常高的敏感性，但是，胶体金吸附方法的敏感性有统计学意义<0．05)。比较低，可能是出现了假阴性。所以，临床上，只是将胶2结果体金吸附法作为一个参考。此次的560份标本中，采用ELISA进行检测时，有90’采用目测的方法受到主观的影响非常大，且对弱阳性标份为阳性，只有S／CO值>8．0的76份样本采用胶体金吸附本很容易出现漏报的情况，不能进行定量检测的

8、开展，在法进行检测为阳性，而S／CO值为1．0～2．5的14份样本采室内的质控也没有办法进行开展。然而酶标仪则不会受到用胶体金吸附法检测，结果为阴性。对其采用手洗5次，再操作人员的主观影响，具有非常高的灵敏度，能够进行质静置5s，酶标板比较干净；进行机洗3次，很容易出现假阳性；量控制，且能够保存完整的临床资料。对抗一HCV检测阳机洗5次可以达到手洗5次的标准。如果甩去酶标板内的性的标本时，最好是使用两种以上的不同厂家试剂进行复血清和酶结合物，用手将酶标板拍干净，静置5～10s，效检