软骨形态发生蛋白1诱导的瘢痕成纤维细胞体内成软骨能力的实验研究.pdf

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1、·JournalofTissueEngineeringandReconstructiveSurgery，December2014，Vo1．10No．6324··论著·doi：10．3969~．issn．1673-0364．2014．06．006软骨形态发生蛋白1诱导的瘢痕成纤维细胞体内成软骨能力的实验研究沈聪聪柴岗曲森侯亦康许秸荣张艳【摘要】目的探讨软骨形态发生蛋白1(CDMP1)诱导的瘢痕成纤维细胞在体内环境下的软骨构建能力。方法取瘢痕切除术后丢弃的增生性瘢痕组织．提取瘢痕成纤维细胞。将瘢痕成纤维细胞与PGA／PLA支架复合，CDMP1软骨诱导液(CDMP1终浓度为10

2、0ng／,nL)进行诱导培养2周，设为诱导组(n=10)；将常规培养液培养的瘢痕成纤维细胞一材料复合物植入裸鼠体内作为阴性对照．设为非诱导组(n：4)；将软骨细胞一材料复合物植入裸鼠体内作为阳性对照，设为软骨组(n=4)。分别于4周和8周后取材，进行各组湿重、糖胺聚糖(GAG)含量测定，HE染色、Safranine—O染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果体内培养4周、8周后各组湿重、GAG含量测定显示，诱导组均高于非诱导组(P<0．05)。体内培养4周后，诱导组HE染色结果显示，瘢痕成纤维细胞诱导后出现软骨细胞陷窝结构：Safranine-O染色结果示，GAG均匀分布于基质：

3、免疫组织化学染色示部分瘢痕成纤维细胞基质中COLlI阳性表达。8周时，诱导组的类软骨结果相对4周时更加成熟．更加符合软骨结构分布结论在CDMP1诱导下，瘢痕成纤维细胞与PGA／PLA材料复合，在体内可以形成类软骨组织．具备一定的成软骨能力【关键词】瘢痕成纤维细胞软骨细胞软骨形态发生蛋白l诱导分化【中图分类号】Q813．1+2【文献标识码】A【文章编号】1673—0364(2014)06—0324—05ChondrogenicDiferentiationofHypertrophicScar-DerivedFibroblastsInitiatedbyCartilage-der

4、ivedMorphogeneticProtein1inVivoSHENCongcong,CHAIGang,QUMiao，HOUYikang,XUYourong,ZHANGYah．DepartmentofPlasticandReconstructiveSurgery,ShanghaiNinthPeopleHospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine，200011Shanghai，ChincaCorrespondingauthor：Zhangran一mail：13651817522@163．com)．【Abstract

5、】ObjectiveToexploretheehondrogenesispotentialofhypertrophicscarfibroblasts(HSFBs)inducedbycarti1age—derivedmorphogenetieprotein1(CDMP1)invivo．MethodsHypertrophicscarfibroblasts(HSFBs)wereisolatedfromdiscardedhypertrophicscar．HSFBscombiningwithPGA／PLAscaffoldasHSFBs—PGA／PLAcomplexwereinduc

6、edbyCDMP1(100ng／mL)for2weeks．Thenthecomplexweretransplantedintonudemiceasinducedgroup(n=10)．Thecomplexthatnotinducedweretreatedasnegativecontrol，namedasun-inducedgroup(n=4)，whilethechondrocytes—PGA／PLAcomplexweretreatedaspositivecontrol，namedaschondrocytegroup=4)．After4and8weeks，thecomple

7、xineachgroupwasharvestedforwetweighttest，proteoglycan(GAG)contenttest，HEstaining，Safranine-Ostainingandimnmnoehemistrystaining．ResultsAfter4and8weeksinvivo，thewetweightandGAGcontentininducedgroupwerebothhigherthaninun—inducedgroup(P<0．05)．Ininducedgroup，afterculture