ⅱ型胶原gags支架对hucmscs成软骨诱导的实验研究

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1、学术学位硕±学位论文：１０６７８分类号；Ｒ６８１３单位代巧．等号＝２０１２４３７密级；足４Ｓ种Ａ常硕壬学位论文ＩＩ型胶原ＧＡＧｓ支架对ＨＵＣＭＳＣｓ成软骨诱导的实验研究院巧）、所昆明医科大学昆明总医碗院床学院硏究生姓名何鹏举学科、专业外科学（骨科）学位类型学术学位指导教师下晶教授二〇—五年四月尾砖Ｍ乎太常硕ｉ学位论文ＩＩ型胶原ＧＡＧｓ支架对ＨＵＣＭＳＣｓ成软骨诱导的实验研巧研巧生姓名何鹏举学科、专业外科学（骨科）申请学位类型学术学位指导教师

2、下晶教授指导小组谭洪波主治医师杨军副主任医师金涛主治医师完成日期二〇—五年四月灵＊略Ｓ种Ａ聲研巧生学位论文研＾撰写声明本人郑重声明：本学位论文是我本人在导师指导下，独立进行学位课题研究所取得的研巧成果。论文中除特别加标注和致谢的地方外，不包含他人或其他机构己经发表或撰写过的研巧成果。对本研究和论文做过贡献的同道我均在论文中作了明确的说明并表明谢意。该学位论文资料若有不实之处，本人愿一切相关责任承担。论文作者（签名）；年一＾Ａ月〇曰／尾略Ｓ种欠嗦研究生学位论文版权使用授权书本

3、学位论文作者完全了解昆明医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可公布论文的全部或部分内容（确属保密内容已注明，并在解密后遵守此规定）；学校可采用影印、缩印或其他手段保存本学位论文。学位论文作者（签名）：指导教师（签名）：了年立月－〇日＞年月曰〇ｂ化／心＾／＂本人及导巧同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盘版）电子＂ＮＫＩ杂志社进行电子和网络出版，并编入Ｃ系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀

4、博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。－学位论文作者（签名）指导教师（签名）：化年月曰卑月曰Ｗ古＾三ｙ目录中文摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３特殊符号６前ｅ７１０引用文献一第部分人腕带间充质干细胞的培养及鉴定１３前胃１３１．１材料与方法１３１２１．结果６１．３讨论１９２１１．４结论引敗献２２第二部分ＩＩ型胶原糖胺聚糖支架的制作及鉴定２５前胃２５２．１材料与方法２５２．２结果２９２．３讨论３３２．４结论３

5、６引用文献巧第Ｈ部分ＨＵＣＭＳＣｓ复合ＩＩ型胶原ＧＡＧｓ支架体外成软骨组织培养及鉴定．．巧前ａ３９３１．材料与方法３９３．２结果４３３．３讨４７３．４结论４９引用文献．５０综述５３１攻读硕±期间的主要成果６１５１谢６２昆明医科大学硕±学位论文；ＩＩ聖胶原ＧＡＧＳ支架对ＨＵＣＭＳＣｓ成软骨诱导的实验研究中文搞要实验目的：本次研究的主要目的是评估人巧带间充质干细胞（ｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｃｏｒｄｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙ

6、ｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓＨＵＣＭＳＣｓ）作为软骨组织工程的种子细胞的可行性，同时评估ＩＩ型胶原复合糖胺聚糖支架材料作为软骨组织工程种子细胞载一体的可行性。主要包括了Ｈ部内容：．人骄带间充质干细跑的培养、传代、冻存、复苏Ｗ及鉴定，对其生物学特性进斤初步的研究，为组织工程学种子细胞的研巧提供实验基础；二．ＩＩ型胶原复合糖胺聚糖支架的制作及其理化性质的鉴定；Ｈ．利用人腺带间充质干细胞在ｎ型胶原复合糖胺聚糖支架体外培养成软骨组织，并对培养出的软骨组织进行鉴定。实验方法；Ｉ．利用昆明总医院临床试验科细胞室提供的原

7、代人廝带间充质干细胞，用含１０％的胎牛血清、ｌＯＯＵ／ｍＬ青霉素、ｌＯＯｍｇ／Ｌ链霉素的ＤＭＥＭ／Ｆ４２培养基－９０％时按进行培养，待其生长至贴壁覆盖约８０％１：３比例进行传代，并在倒、增殖情况及其形态变化置显微镜下观察ＨＵＣＭＳＣｓ的生长。取原代、第Ｈ代细胞进行流式细胞仪检测。用膜蛋白酶／ＥＤＴＡ消化液将传代的细胞消化，１０００转／分钟下离也５分钟，将离也的最下层细胞ＷＦＢＳ配制的１０％二甲基‘亚讽重置－，８０Ｃ冰箱保２４小时后３存将其转入液氮罐肉保存，个月后取出进行复苏、培养、传代及流式细胞术。２Ｉ．通

8、过将软曾粉碎后行脱细胞处理型胶原复合糖胺聚糖多孔支架，在，制备Ｉ扫描电镜下进行观察，测定支架材料的孔径、孔隙率，，并测试其亲水性对支架材料进行相应的组织学及生化分析。